生物化学：DNA的变性与复性.pptVIP

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2022-06-23 发布于江西
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生物化学：DNA的变性与复性.ppt

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* DNA的变性与复性 DNA的变性变性的概念 1 变性条件 2 变性的特征 3 CONTENTS 1、概念在某些理化因素作用下，DNA分子互补碱基对之间的氢键断裂，使DNA双螺旋结构松散，变成单链，即为DNA变性。 2、变性的条件能够引起核酸变性的因素有：加热:实验室最常用的使DNA分子变性的方法之一是加热。酸碱度改变: 有机溶剂如甲醛和尿素等； 3、特征变性核酸将失去部分或全部的生物活性。变性改变了DNA的二级结构,一级结构(碱基顺序)保持不变。 DNA的变性过程是突变性的，它在很窄的温度区间内完成。 DNA解链温度Tm. Tm 当50% 的DNA变性时的温度称为该DNA的解链温度，即增色效应达到一半时的温度；一般DNA的Tm值在70-85?C之间。影响因素：均一DNA的Tm值范围较小。分子中G和C的含量越高，Tm值越高。 Tm值较低，则易变性，不易保存。增色效应 260nm处紫外吸收值明显增加，即增色效应。 DNA分子在热变性条件下，双螺旋结构破坏，碱基暴露，在紫外光260nm波长处的吸收度明显增加，称为增色效应。 DNA的复性与杂交技术复性概念复性的条件分子杂交技术 1、概念变性DNA在适当的条件下，两条彼此分开的单链可重新缔合成为双螺旋结构，其物理性质和生物活性随之恢复，这一过程称为复性。对热变性的DNA，在缓慢冷却的条件下可重新结合恢复双螺旋结构，称为退火。（PCR技术） DNA复性后，生物活性一般只能得到部分的恢复。 *