基因工程常规技术核酸提取纯化 (2).pptVIP

常用：无水乙醇、异丙醇 乙醇沉淀法的额外优点是将短链和单体核酸成分留在了溶液中。核糖核酸酶处理产生的核苷酸因此在这一步得到了去除。 （3）沉淀DNA * 第三十一张，课件共六十七张，编辑于2022年5月 * 第三十二张，课件共六十七张，编辑于2022年5月 * 第三十三张，课件共六十七张，编辑于2022年5月 一般过程及原理： 动物组织剪成小块，匀浆或置液氮中冻结后研磨成细粉末。 组织培养的细胞用胰酶消化松散后直接使用。 （1）组织粉碎 2. 哺乳动物细胞基因组DNA的抽提 * 第三十四张，课件共六十七张，编辑于2022年5月 0.5%SDS和0.1mg/ml蛋白酶K。50 oC温育。 （2）细胞裂解 （3）纯化DNA 用苯酚和酚-氯仿抽提除去蛋白质污染。 SDS是离子型去垢剂（detergent），可以使细胞膜崩解。 （5）除去RNA污染 RNase。 无水乙醇（可以加入1/10体积的3M乙酸铵辅助沉淀） 异丙醇 （4）沉淀DNA * 第三十五张，课件共六十七张，编辑于2022年5月 一般过程及原理： （1）组织粉碎 用液氮冷冻后研磨成细粉末。 3. 从植物组织中制备 DNA （2）细胞裂解 用2%CTAB/2-ME (十六烷基三甲基溴化铵/2巯基乙醇）。 或1% SDS和蛋白酶K。 65oC温育1h左右。 2% CTAB抽提缓冲液：CTAB 10