基因信息的传递基因重组与基因工程.pptVIP

（三）外源基因与载体的连接 1. 粘性末端连接 方式：(1)同一限制酶切位点连接 (2)不同限制酶切位点连接 配伍末端连接 非配伍末端连接 （二）克隆载体的选择和构建 第六十二张，课件共九十一张，编辑于2022年5月 Bam HⅠ切割反应 GGATCC CCTAGG T4 DNA连接酶 15oC GATCC G G CCTAG + 目的基因用 Bam HⅠ切割 载体DNA用Bam HⅠ切割 重组体 载体自连 目的基因自连 同一限制酶切位点连接 第六十三张，课件共九十一张，编辑于2022年5月 不同限制酶切位点（非配伍末端）的连接 Eco RⅠ切割位点 Bg lⅡ切割位点 + EcoRⅠ+ Bg lⅡ 双酶切 Eco RⅠ+ Bg lⅡ 双酶切 T4 DNA连接酶 15oC 重组体 配伍末端的连接情况和同一限制酶切位点连接相似。 第六十四张，课件共九十一张，编辑于2022年5月 2. 平端连接 适用于：限制性内切酶切割产生的平端 粘端补齐或切平形成的平端 第六十五张，课件共九十一张，编辑于2022年5月 目的基因 载体 限制性内切酶 限制性内切酶 T4 DNA连接酶 15oC 重组体 载体自连 目的基因 自连 第六十六张，课件共九十一张，编辑于2022年5月 3. 同聚物加尾连接 在末端转移酶(terminal transferase)的作用下，在DNA片