基因工程目的基因的制备.pptVIP

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 方法二： 将分离的特定蛋白作为抗原， 免疫动物制备抗体。 用特异的抗体筛选含目的基因的表达型文库。 * 第六十二张，课件共八十二张，编辑于2022年5月 注意事项： 文库是表达型，有表达的蛋白与抗体反应。 一般以融合形式表达目的基因。将cDNA插入到细菌基因的下游，使细菌的基因与插入基因相连，表达时生生一个融合蛋白，比产生天然蛋白要稳定，也可产生高水平的表达。 必须考虑cDNA在表达载体中的方向和阅读框架问题，以保证目的基因的正确表达。 * 第六十三张，课件共八十二张，编辑于2022年5月 2、功能互补法克隆基因。 将重组DNA分子导入一种大肠杆菌营养缺陷型菌株的受体细胞， 然后将此受体细胞在缺少所需要的营养底物的基本培养基培养。 只有那些获得了营养缺陷型互补基因的受体才会长成转化菌落。 * 第六十四张，课件共八十二张，编辑于2022年5月 二、序列克隆法 1、根据已知基因序列分离目的基因. 利用基因中部分保守序列设计合成探针，筛选基因文库获得全序列。 * 第六十五张，课件共八十二张，编辑于2022年5月 探针 杂交 覆盖膜印迹 取下膜 杂交位点与菌落比对 * 第六十六张，课件共八十二张，编辑于2022年