基因工程的基本技术.pptVIP

PCR操作流程 94℃ 50 ℃ 72 ℃ 第三十一张，课件共五十一张，编辑于2022年5月 ? 2、 PCR反应过程： 变性：DNA双链变为单链； 退火：引物与模板结合； 延伸：合成互补链； 上述过程通过PCR仪的程序设计及自动运作完成。 第三十二张，课件共五十一张，编辑于2022年5月 ? 3、 PCR反应体系： 体系成分：模板DNA、引物、Taq酶(热稳定性)、 dNTP、反应缓冲液（Mg2+ 、 BSA、Tween20、DTT 、 Tris.cl ） 。 第三十三张，课件共五十一张，编辑于2022年5月 1）、引物（寡聚核苷酸） §一般成对出现，长度为15-30个核苷酸； § 使用浓度： 0.1-0.5uM，高达1uM； § 引物设计原则： 1、G+C含量45-55%； 2、Tm值高于55； 3、引物特异性； 4、引物扩增跨度； 5、是否形成引物二聚体 第三十四张，课件共五十一张，编辑于2022年5月 2）、模板DNA： §基因组DNA、质粒DNA、其它DNA片段； §质量要求：不高 3）、Taq酶(热稳定性)： §常规酶 §高保真酶：ExTaq