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第四章培养条件 第1页，共27页，编辑于2022年，星期二 　概 述 　 在植物组织培养中与植物栽培一样，要受到物理环境条件、化学环境 条件、生物环境条件的影响。 　　物理环境条件：温度、光照和湿度等； 　　化学环境条件：不同气体;培养基的组成; pH值;渗透压等； 　　生物环境条件：培养的外植体部位、大小、细胞密度等。 　　本章主要阐述理化条件对培养生长的影响。 　　因此，如何根据需要来控制培养条件是组织培养中的一个重要问题. 组织培养的一个有利方面是培养条件比较容易控制。 第2页，共27页，编辑于2022年，星期二 　　温度是植物组织培养中成功的 重要条件。 为保持一定的温度，一般在密 闭保温较好的培养室中进行，由空 调机或调温调湿机等来调节室温。 △ 1.温度（temperature) 第3页，共27页，编辑于2022年，星期二 　　植物组织培养在最适宜的温度下生长分化才能表现良好，大多数 植物组织培养都是在25±2oC之间进行： 1.一般控制在25±2oC。低于15℃时培养，植物组织会表现生长停止， 高于35℃时对植物生长不利。 2.植株种类及外植体的不同，其最适温度也是不同的。如百合20℃； 月季25－27℃；番茄28℃；菊芋30℃。 　 在植物组织培养中大多采用最适温度，并保持恒温培养，以加速 生长。 最适温度 第4页，共27页，编辑于2022年，星期二 不同培养目标采用的培养温度也不同。实例：百合鳞片在30℃以下再生的小鳞茎的发叶速度和百分率比在25 ℃以下的高。桃胚在2～5℃条件进行一定时间的低温处理，有利于提高胚培养成活率。用35℃处理草莓的茎尖分生组织3～5d，可得到无病毒苗。 温度不仅影响植物组织培养苗的生长速度，也影响其分化增殖以及器官建成等发育进程。 实例：烟草芽的形成以18℃为最好，在12℃以下，33℃以上形成率皆最低。菊芋块茎组织在15℃以下发根受到很大影响。  温度对植物生长的影响 第5页，共27页，编辑于2022年，星期二 温度对植物生长的影响 　　温度控制内源细胞分裂素代谢系统的变化，从而表现出不同温度 对生长的影响。 实例：在烟草细胞培养增殖条件的研究中发现，26℃时由于内源细胞分 裂素在起作用，故不用添加细胞分裂素就能很好增殖。而16℃时内源细 胞分裂素不起作用，故需添加细胞分裂素。 这种对细胞分裂素需要的情况的差异，说明温度控制了内源细胞分 裂素代谢系统的变化，也就表现出不同温度对生长的影响。 第6页，共27页，编辑于2022年，星期二 温度预处理的影响 　　在植物组织培养以前先对培养材料进行低温或高温处理，往往有促 进诱导生长的作用。为此，常在培养实践中采用。例如： 胡萝卜切片在4℃下处理16～32min，比未处理的可大大加快生长。 天竺葵茎尖在10℃低温下处理14周，比在20℃和30℃中的可大大提高茎尖繁殖数。 菊芋块茎组织低温或高温预处理，均可促进生根。 胚培养中先进行低温预处理，有利于萌发。 第7页，共27页，编辑于2022年，星期二 2.湿 度 湿度的影响包括培养容器和环境的湿度条件 2.1培养容器内的湿度： 　 主要受到培养基含水量和封口材料的影响。前者又受琼脂含量的影响。在冬季应适当减少琼脂用量，否则，将使培养基干硬，以致不利于外植体接触或插进培养基，导致生长发育受阻。封口材料直接影响容器内湿度情况，但封闭度较高的封口材料易引起通透性受阻，也导致生长发育受影响；封口膜过于透气，也会使瓶内湿度下降。 第8页，共27页，编辑于2022年，星期二 环境的相对湿度可以影响培养基的水分蒸发， 一般要求70～80%的相对湿度， 常用加湿器或经常洒水的方法来调节湿度。 湿度过低会使培养基丧失大量水分，导致培养基各种成分浓度的改变和渗透压的升高，进而影响组织培养的正常进行；过高时，易引起棉塞长霉，造成污染。 2.2 环境湿度 第9页，共27页，编辑于2022年，星期二 3.光 照 组织培养中光照也是重要条件。 主要表现在光强、光质、以及光照时间方面。它对细胞、组织、器官的生长及分化有很大影响。也与材料的性质、培养基的情况，以及由于光照随之温度的上升等多方面因素有关。 第10页，共27页，编辑于2022年，星期二 　　光照强度对培养细胞的增殖和器官的分化有重要影响． 　　从目前的研究情况看，主要表现在以下几个方面： ★ 影响外植体细胞的增殖、组织和器官的分化。 ★ 有的材料愈伤组织的诱导需光或需暗； ★ 光照强，幼苗生长健壮； ★ 光照弱，幼苗生长弱小，容易徒长。 ★ 有的材料适合光培养，有的则适合暗培养。 举例如下：① 地