类胡萝卜素的测定方法.pdfVIP

类胡萝卜素的测定方法（高效液相色谱法） 本方法适用于各类食品中以羟基类胡萝卜素为主的多种类胡萝卜素的测定。 本方法最低检出量为：α-胡萝卜素为5ng/mL ，β-胡萝卜素为mL，γ-胡萝卜素为mL，番茄红 素为mL，斑蝥黄素为mL。 1. 方法提要 样品以丙酮-石油醚（1+1 体积比）混合溶剂反复萃取使类胡萝卜素与其他成分分离，在450n 波长条件下进行HPLC 分析检测，通过外标法计算各种类胡萝卜素的含量。 2. 仪器 （1）高效液相色谱仪。 （2 ）冷凝回流皂化装置。 （3 ）旋转蒸发仪。 （4 ）离心机（5000r/min ）。 3. 试剂 本方法所使用试剂除特殊注明外，均为分析纯；所用水为重蒸馏水。 （1）丙酮-石油醚（1+1 体积比）混合溶剂：取相同体积的丙酮、石油醚混匀。 （2 ）50% KOH 甲醇-水溶液：称取250g 氢氧化钾，用50mL 适量水溶解后，用甲醇定容至 500mL 容量瓶，备用。 （3 ）无水硫酸钠（Na-2SO4）。 （4 ）二丁基羟基甲苯（BHT）。 （5 ）无水乙醇（C2H5OH ）。 （6 ）流动相使用液：按乙腈+二氯甲烷+ 甲醇（85+10+5 ）比例准确量取各溶剂，并充分混匀， 经.45μ 微孔膜过滤后使用。 （7 ）类胡萝卜素标样：α-胡萝卜素、β-胡萝卜素、γ-