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专题01 基因工程
1.基因工程的概念
(1)供体:提供目的基因。
(2)操作环境:体外。
(3)操作水平:分子水平.
(4)原理:基因重组。
(5)受体:表达目的基因。
(6)本质:性状在受体体内的表达.
(7)优点:克服远缘杂交不亲和的障碍,定向改造生物的遗传性状。
2.DNA重组技术的基本工具
(1)限制性核酸内切酶(简称:限制酶)
①来源:主要是从原核生物中分离纯化出来的。
②作用:识别特定的核苷酸序列并切开特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键.
③结果:产生黏性末端或平末端。
(2)DNA连接酶
①种类:按来源可分为E·coli DNA连接酶和T4DNA连接酶。
②作用:将双链DNA片段“缝合起来,恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键.
③DNA连接酶和限制酶的关系
(3)载体
①种类:质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等.
②质粒的特点eq \b\lc\{\rc\ (\a\vs4\al\co1(能自我复制,有一个至多个限制酶切割位点,有特殊的标记基因))
3.基因工程的操作过程与应用
(1)基因工程的操作步骤
(2)基因工程的应用:培育转基因植物和转基因动物,生产基因工程药物,进行基因治疗.
(3)目的基因导入不同受体细胞的过程
生物种类
植物
动物
微生物
常用方法
农杆菌转化法
显微注射技术
感受态细胞法
受体细胞
体细胞或受精卵
受精卵
原核细胞
转化过程
将目的基因插入到Ti质粒的T。DNA上→农杆菌→导入植物细胞→整合到受体细胞染色体的DNA上→表达
将含有目的基因的表达载体提纯→取卵(受精卵)→显微注射→受精卵发育→获得具有新性状的动物
Ca2+处理细胞→感受态细胞→重组表达载体DNA分子与感受态细胞混合→感受态细胞吸收DNA分子
(4)基因治疗与基因诊断的不同点
原理
操作过程
进展
基因治疗
基因表达
利用正常基因导入有基因缺陷的细胞中,以表达出正常性状来治疗(疾病)
临床实验
基因诊断
碱基互补配对
制作特定DNA探针与病人样品DNA混合,分析杂交带情况
临床应用
4.蛋白质工程
(1)流程图
写出流程图中字母代表的含义:
A.转录,B.翻译,C.分子设计,D.多肽链,E.预期功能。
(2)结果:改造了现有蛋白质或制造出新的蛋白质。
(3)应用:主要集中应用于对现有蛋白质进行改造,改良生物性状。
(25~30分钟)
选择题
1.下列关于基因工程的叙述中错误的是
A.基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建
B.将目的基因导入大肠杆菌细胞常用Ca2+处理法
C.基因工程技术可以定向改造生物的性状,培育新的生物品种
D.基因工程技术是唯一能打破远缘杂交不亲和障碍培育生物新品种的方法
【答案】D
【解析】基因工程的步骤为:获取目的基因、构建基因表达载体、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定,其中基因表达载体的构建是基因工程的核心步骤,A正确;以大肠杆菌为受体细胞时,先要用Ca2+处理细胞以使其处于感受态,以便目的基因的导入,B正确;基因工程可以按照人们的意愿,克服不同物种之间的生殖隔离,实现生物的定向变异,从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品,培育新的生物品种,C正确;基因工程技术和细胞工程技术都能打破远缘杂交不亲和障碍,培育生物新品种,D错误。
2.酵母菌细胞壁的主要成分是几丁质。酿酒酵母产酒精能力强,但没有合成淀粉酶的能力;糖化酵母能合成淀粉酶,但酒精发酵能力弱.科研人员通过两种途径改良酵母菌种,实现以淀粉为底物高效生产酒精的目的。下列叙述正确的是
A.途径Ⅰ需用纤维素酶处理酵母菌,再利用PEG诱导融合
B.途径Ⅱ需要以淀粉酶基因作为目的基因构建表达载体
C.途径Ⅰ和途径Ⅱ最终获得的目的酵母菌染色体数目相同
D.以淀粉转化为还原糖的效率作为最终鉴定目的菌的指标
【答案】B
【解析】途径Ⅰ需用几丁质酶处理酵母菌,再利用PEG诱导融合,A错误;根据题意,途径Ⅱ需要以淀粉酶基因作为目的基因构建表达载体,以便于导入受体细胞中,B正确;途径Ⅰ获得的目的菌株为多倍体,是原来两种酵母菌染色体数目之和,途径Ⅱ获得的目的酵母菌染色体数目与原来酵母菌染色体数目相同,C错误;鉴定目的菌株的依据是酵母菌合成淀粉的能力和酒精发酵的能力,D错误。
3.科学家构建了含有大洋鳕鱼抗冻蛋白基因启动子和大鳞鲑鱼生长激素基因的表达载体,并将其导入了大西洋鲑的细胞中,获得了生长速度加快的转基因大西洋鲑。相关叙述正确的是
A.转基因大西洋鲑体内抗冻蛋白明显增加
B.构建基因表达载体需要限制酶和DNA聚合酶
C.大鳞鲑鱼生长激素基因不能通过PCR技术扩增获得
D.转基因大西洋鲑生长激素含量增加导致生长速度加快
【答案】D
【解析】转基因大西洋鲑体内抗冻蛋白有所增加,但是不会明显增加,A错误;构建基因表达载体
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