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临床免疫学检验
1、免疫:是机体识别和排斥抗原性异物的一种生理功能 2、免疫防范(对外);免疫自稳(防自身免疫病);免疫监视(防肿瘤)。
3、中枢免疫器官:骨髓、胸腺;外周免疫器官:淋巴结、脾脏(最大)、黏膜相关淋巴组 织4、B细胞:通过识别膜免疫球蛋白来结合抗原,介导体液免疫;B细胞受体=BCR=mIg
外表标志:膜免疫球蛋白(Smlg)、Fc受体、补体受体、EB病毒受体和小鼠红细胞受体。
成熟B细胞:CD19、CD20、CD21、CD22 (成熟B细胞的mlg主要为mlgM和mlgD)同时检 测CD5分子,可分为B1细胞和B2细胞。
B细胞功能检测方法:溶血空斑形成试验(体液免疫功能)。
5、T细胞:介导细胞免疫。共同外表标志是CD3 (多链糖蛋白);帮助T细胞的标志是CD4 ; 杀伤T细胞的标志是CD8 ; T细胞受体二TCR。
T细胞和NK细胞的共同外表标志是CD2 (绵羊红细胞受体);CD3 + CD4+CD8-=帮助性 T 细胞(Th)
CD3 + CD4-CD8+ =细胞毒性T细胞(Tc或CTL) (T细胞介导的细胞毒试验)CD4 + CD25+ =调整性 T 细胞(Tr 或 Treg)
T细胞功能检测:植物血凝素(PHA)刀豆素(CONA)刺激T细胞增殖。增殖试验有:形态 法、核素法。
T细胞亚群的分别:亲和板结合分别法,磁性微球分别法,荧光激活细胞分别仪分别法*E花环试验是通过检测SRBC受体而对T细胞进行计数的一种试验;
6、NK细胞:具有细胞介导的细胞毒作用。直接杀伤靶细胞(肿瘤细胞和病毒感染的细胞) 外表标志:CD16 (ADCC)、CD56。
测定人NK细胞活性的靶细胞多用K562细胞株,而测定小鼠NK细胞活性那么常采纳YAC-1细 胞株。
7、吞噬细胞包括:单核-吞噬细胞系统(MPS,外表标志CD14,包括骨髓内的前单核细胞、 外周血中的单核细胞和组织内的巨噬细胞)和中性粒细胞。(表达MHCn类分子)8、人成熟树突状细胞(DC)(专职抗原呈递功能):外表标志为CDla、CDllc和CD83。
9、免疫球蛋白可分为分泌型(sig,主要存在于体液中,具有抗体功能)及膜型(mlg,作 为抗原受体表达于B细胞外表,称为膜外表免疫球蛋白)10、免疫球蛋白按含量多少排序:地6〉1目人〉1且11〉里口〉1且£五类(按重链恒定区抗原性(01) 排序)
免疫球蛋白含量测定:单向环状免疫集中法、免疫比浊法。
11、免疫球蛋白的同种型抗原打算簇位于恒定区(CH、CL)12、抗体由浆细胞产生。抗体分子上VH和VL (高变区)是抗原结合部位。
13、IgG :血清中含量最高的免疫球蛋白(IgGl最高),血液和细胞外液中的主要抗体。也 是再次免疫应答的主要抗体,是唯一能通过胎盘的抗体,大多数抗菌抗体、抗病毒抗体是 IgG,某些自身抗体及超敏n型抗体是IgG 5免疫学检测中其次抗体也以IgG为主。
14、IgA :分血清型(单体存在)及分泌型;分泌型IgA (slgA)为二聚体,性能稳定,主 要存在于胃肠道、支气管分泌液、初乳、唾液、泪液中,局部浓度高,是参加黏膜局部免疫 的主要抗体。
15、IgM :为五聚体,主要存在于血液中,是Ig中分子量最大的(又称巨球蛋白)。个体发 育最早合成和分泌的抗体。抗原刺激后体液免疫应答中最先产生的抗体5感染过程中血清 IgM水平上升,说明近期感染。新生儿脐血中假设IgM增高,提示有宫内感染。
16、IgE :为单体结构,正常人血清中含量最低。IgE为亲细胞抗体,介导I型超敏反响。 特异性过敏反响和寄生虫早期感染患者血清中可上升。
17、补体:具有酶祥活性的球蛋白(肝细胞、巨噬细胞产生);激活途径主要有三种:经典 途径(以结合抗原后的IgG或IgM类抗体为主要激活剂(双链DNA),。?C9全部参加)、 替代途径(病原微生物细胞壁成分(脂多糖)直接激活补体C3,然后完成C5?C9的激活过 程)、MBL途径(由急性炎症期产生的甘露糖结合凝集素(MBL)与病原体结合后启动激活)。
18、补体系统中C3含量最多,C2含量最少。
19、灭活:加热56℃30分钟,补体丧失活性20、补体清除免疫复合物的方式:吞噬调理;免疫粘附;免疫复合物抑制。
21、完全抗原二反响原性+免疫原性。半抗原二反响原性(无免疫原性)22、抗原抗体结合力(分子间引力):静电吸引、范德华力、氢键、疏水作用力(最强)
23、抗原抗体反响的四大特点:特异性、可逆性、比例性、阶段性;受反响条件(如温度、 pH、电解质、抗原抗体比例等)的影响。
24、抗体过度一一前带;抗原过度一一后带(钩状效应)25、抗原抗体反响可分为两个阶段:第一阶段为抗原与抗体发生特异性结合的阶段,此阶段 反响快,仅需几秒至几分钟,但不消失可见反响;其次阶段为可见反响阶
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