口蹄疫诊断技术规程.docxVIP

口蹄疫诊断技术规程 1 .范围 本规程规定了口蹄疫正向间接血凝试验、屠宰品中口蹄疫病毒检测试验及口蹄疫 病毒 RT - PCR 检测试验。正向间接血凝试验适用于口蹄疫疫苗接种血清抗体水 平监测、流行病学调查和进出口动物检疫；口蹄疫病毒检测试验和 RT - PCR 检 测试验适用于猪的屠宰品中的口蹄疫病毒检测。 2 .正向间接血凝试验 2. 1 试剂 2.L1 纯化灭活口蹄疫病毒致敏醛化蹂酸化绵羊红细胞，标准阳性、阴性血清, 由中国农业科学院兰州兽医研究所生产。 2.L2 稀释液，配制方法见附录 A。 2. 2 操作方法 2. 2.1 待检血清的灭活 将待检血清放人 56c 水浴中灭活 30 分钟。 2. 2. 2 待检血清的稀释 用稀释液将待检血清稀释成 1： 4, 1： 8, 1： 16, 1： 32, 1： 64, 1： 128, 1： 256, 1： 512 等 8 个稀释度。 2.2.3 阴、阳性血清的稀释 用稀释液将阴性对照血清稀释成 1:16,将阳性对照血清稀释成 1： 5120 2. 2. 4 加样 在干净的 V 型 96 孔 110。血凝板的第 1?8 孔加各稀释度待检血清50 HL 第 10 孔 加 1： 16 的阴性对照血清50 111,第 11 孔加口蹄疫 0 型阳性对照血清 (1:512) 50 U1；第 12 孔加稀释液50 口 1