植物基因工程-08级.pptVIP

第七章 植物基因工程 一、植物基因工程的发展现状 二、植物基因工程方法 三、转化子细胞的筛选 四、转化体的鉴定与证实 五、植物基因工程研究的应用和展望 一、植物基因工程的发展现状 1、植物的遗传改良方法 传统的育种方法 以基因突变体为种质基础，以有性杂交为基因导入手段，以选择优良基因型重组体为目的的植物性状的改良过程。 植物基因工程 以植物为受体的一种基因操作，即以分子生物学为理论基础，采用基因克隆、遗传转化，以及细胞、组织培养技术将外源基因转移并整合到受体植物的基因组中，并使其在后代植株中得以正确表达和稳定遗传，从而使受体获得新性状的技术体系。 2、植物基因工程的应用前景 改变植物的遗传性状。 获得抗病、抗虫、抗除草剂等抗逆性状； 改良农作物农艺性状，提高产品质量； 改变植物的育性和不亲合性。 作为一种生物反应器。 药用蛋白和植物次生代谢产物的生产； 生产某些有机化合物。 植物基因功能研究。 3、植物基因工程研究成果 通过国家商品化生产或安全证书的有转基因耐贮藏番茄、转查尔酮合成酶基因矮牵牛、抗病毒甜椒、抗病毒番茄、抗病毒辣椒、抗虫棉花等6种我国自主研制的转基因植物。 转基因番茄 ?? ??1994年，美国政府批准了他们研制成功抗干旱、早熟、保鲜的转基因番茄商品化之后，我国也相继成功培育出优良品种的转基因番茄，以满足人们的需求。 转基因甜椒 甜椒在栽培的过程中，容易受病毒的感染。我国科学工作者，采用转基因技术，培育出抗病毒的甜椒。 转基因玉米 玉米是主要粮食之一，又可以提炼油脂，也可以用作食品和工业的原料以及作饲料，浑身是宝。人们称它是含金的植物。如今培育出转基因玉米，品质更好，产量更高。 我国科学工作者，用转基因技术，可以转变矮牵牛花的花色，使矮牵牛花的花色更加丰富多彩。 转基因牵牛花 转基因油菜 ????油菜是人们食用油的主要来源之一。一般油菜籽的含油量约为40％左右。通过转基因技术，培育出来的油菜籽，可以大大地提高它的出油率。而且油的纯度质量更好 转基因小麦 ????从植物体中分离出合成赖氨酸的基因，把这基因转入小麦植株中，培育出转基因小麦。用这种转基因小麦制造出来的面粉，更适合用来烤面包，而且面粉中赖氨酸含量高，这种面包的营养价值高。 二、植物基因转化的方法 原生质体介导法 基因枪法 根癌农杆菌介导法 种质系统的基因转移（花粉管导入法） 1、原生质体介导法 以原生质体为受体，借助于特定的化学或物理手段将外源DNA直接导入植物细胞的方法。 原生质体介导的基因转化是植物遗传转化研究中最早建立的一个转化系统。包括5种方法： 聚乙二醇介导的基因转化 脂质体介导基因转化 电激法介导基因转化 显微注射介导的基因转化 激光微束介导的基因转化 PEG介导的基因转化 利用化学试剂，如聚乙二醇(PEG)、聚乙烯醇(PVA)、多聚-L-鸟氨酸(pLO)和磷酸钙等，诱导原生质体摄取外源DNA分子，进入原生质体的外源DNA分子就有可能通过某种机制整合到基因组中，完成遗传转化过程。 第一例成功的转基因烟草就使用该转化方法获得的。 脂质体介导基因转化 利用脂类化学物质包裹外源DNA成球体，通过植物原生质体的吞噬或融合作用把包含外源DNA的脂质体转入受体细胞。 特点：转化率高；操作繁琐；技术性更高。 电激法介导基因转化 利用高压电脉冲作用，在原生质体膜上“电激穿孔” ，形成可逆的瞬间通道,从而促进外源DNA进入原生质体。 特点：转化率高；操作简便 ；特别适于瞬时表达的研究；容易造成原生质体损伤。 显微注射介导的基因转化 利用显微注射仪将外源DNA直接注入受体的细胞质或细胞核，从而实现外源基因的转移。 特点：方法简单、转化率高；适用于各种植物和材料，无局限性；对受体细胞无毒害。 激光微束介导的基因转化 将激光引入光学显微镜聚焦成微米级的微束照射培养细胞，在细胞膜上形成能自我愈合的小孔，使加入细胞培养基里的外源DNA流入细胞，实现基因的转移。 优点：操作简便；工作效率高；适应于各种动植物；受体的类型广泛；用于细胞器的基因转化。 2、基因枪法(particle gun) 将外源DNA包被在微小的金粒或钨粒表面，然后在高压的作用下将微粒高速射入受体细胞或组织，微粒上的外源DNA进入细胞后，整合到植物染色体上并得到表达，从而实现外源基因的转化。 根据基因枪的动力系统，分为3种类型 火药爆炸力为加速动力，采用塑料子弹和阻挡板。塑料子弹前端载放着DNA包裹的钨/金粉。 高压气体作为动力，如氦气、氢气、氮气等。把载有DNA的钨/金粉铺洒在一张微粒载片上，在