SDS碱裂解法制备质粒DNA大量制备.pdfVIP

SDS 碱裂解法制备质粒 DNA: 大量制备 用碱和 SDS 处理可以大规模（ 500ml ）的细菌培养物中分离质粒 DNA ，所 获得的质粒则可通过柱层析或 CsCl- 溴化乙锭梯度离心进一步纯化。 材料 ： 碱裂解液Ⅰ： 若欲用柱层析进一步纯化所制备的质粒 DNA ，无菌的碱裂解液 I 在使用前 可补充适当体积的去 DNA 酶的 RNA 酶 A （胰 RNA 酶）（20mg/ml ） , 使 之终浓度为 100ug/ml ，若欲用其他的方法纯化 DNA ，则不推荐在此步骤添 加 RNA 酶。 碱裂解液Ⅱ ： 裂解液Ⅱ应新鲜制备，于常温下使用。 碱裂解液Ⅲ ： 用于筛选质粒的抗生素 氯霉素（ 34mg/ml ） 选用：乙醇 ；异丙烷 ；酚：氯仿（ 1 ： 1 ， V/V ） ；S