医学遗传学南方医科大学单基因病致病基因的鉴定.pptxVIP

会计学 1 医学遗传学南方医科大学单基因病致病基因的鉴定 2 本章主要内容: 功能克隆 定位克隆 基于高通量测序技术的致病基因的鉴定 第1页/共17页 3 功能克隆：从蛋白质着手进行基因克隆的策略。 定位克隆：在蛋白质产物未知的情况下进行基因克隆的策略。 蛋白 酶消化、分离 氨基酸序列测定 设计合成寡核苷酸 筛选cDNA文库 不同多肽片段 家系资料 连锁分析 获得差异片段 染色体异常 筛选cDNA文库 克隆全长基因 精细定位 消减克隆 第2页/共17页 第一节 功能克隆 4 通过基因的功能（编码蛋白）而不依赖定位的信息来分离基因的策略 第一个疾病致病基因通过此策略发现 范例：镰状细胞贫血的β-珠蛋白基因 苯丙酮尿症的苯丙氨酸羟化酶基因 第3页/共17页 流程示意图 5 第4页/共17页 6 ☆ FⅧ因子基因的功能克隆 功能克隆是从蛋白质着手进行基因克隆的策略。 Ⅷ因子 多肽 不同多肽片段 蛋白酶消化 分离 氨基酸序列测定 设计合成寡核苷酸 筛选cDNA文库 第5页/共17页 第二节 定位克隆 7 基于染色体异常的基因定位 连锁分析 确定致病基因 第6页/共17页 8 基于染色体异常的基因定位 第7页/共17页 9 连锁分析 第8页/共17页 10 确定致病基