SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳原理.pdfVIP

聚丙烯酰氨凝胶电泳 作用原理 聚丙烯酰胺凝胶电泳是网状结构， 具有 分子筛效应 ，它有两种形式， 一种是 非变性聚丙烯酰胺凝胶， 蛋白质在电泳中保持完整的状态， 蛋白在其中依三种因 素分开：蛋白大小，形状和电荷。 而 SDS仅根据蛋白分子量亚基的不同而分离蛋白。这个技术首先是 1967 年由 shapiro 建立，他们发现在样品介质和丙烯酰胺凝胶中加入离子去污 剂和强还原剂后， 蛋白质亚基的电泳迁移率主要取决于亚基分子量的大小， 电荷 因素可以忽视。 SDS是阴离子去污剂，作为 变性剂和助溶试剂 ，它能断裂分子内和分子间的 氢键，使分子去折叠，破坏蛋白分子的二、三级结构。而强还原剂如巯基乙醇， 二硫苏糖醇能使半胱氨酸残基间的二硫键断裂。在样品和凝胶中加入还原剂和 SDS后，分子被解聚成多肽链，解聚后的氨基酸侧链和 SDS结合成蛋白 - SDS 胶 束，所带的负电荷大大超过了蛋白原有的蛋白量，