拆分蛋白质多聚体为单体的试验方法.docxVIP

拆分蛋白质多聚体为单体的试验方法以前回答网友提问时写的。 拆分蛋白质多聚体为单体的试验方法可以参考亲和层析的试验方法： 转变pH值或离子强度：比方可以使用NaCl梯度拆解，主要是用于静电作用引起的相互作用 的蛋白质多聚体，转变pH值可以跟缓冲溶液的组成加入相应的酸或者碱； 假如蛋白质多聚体主要为疏水相互作用，而且转变pH值的结果不够有效，那么需要用激烈的 条件，比方加入聚乙二醇(最多到到60%,要分梯度加入)或二甲基亚碉(dimethylsulfoxide) (一般最多到到10%,要分梯度加入)以降低水溶液的极性 可以考虑加入加入去垢剂(外表活性剂)，它们是具有亲水基又具有疏水基的物质，能够在低 于临界胶束浓度(Citical Micelle Concentration ,简称：CMC)时有效结合于蛋白质的 疏水区域，因此一般具有乳化、分散、和增溶作用，可分阴离子、阳离子和中性去垢剂等多 种类型，中性去垢剂在蛋白提取钟应用的较多。 “一般考虑使用的是：中性去垢剂或生物外表活性剂。 中性去垢剂又称非离子外表活性剂，对蛋白质的变性作用影响较少，宜于蛋白质或酶提取 之用。一般市售中性去垢剂有聚乙二醇类，如PEG200；多元醇类外表活性剂，如山梨醇、 司盘类和吐温类；聚氧乙烯脂肪醇酸，如苇泽类、平平加类；聚氧乙烯烷基苯酚醴，如Igepal CO、乳化剂OP、Triton. Pluronic