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动物细胞工程应用2021/7/27 星期二动物细胞培养动物细胞工程常用技术核移植动物细胞融合单克隆抗体技术2021/7/27 星期二 皮肤烧伤，如果创面很小（不大于硬币）只要保持清洁，甚至深度烧伤，也可能自愈。如果下层真皮受损面积较大，常常需要植皮。植皮需要的健康皮片。植皮需要的健康皮片，可以取自烧伤病人自身未烧伤的部位（自体植皮），也可取自其他活人或尸体（异体植皮）等。自体植皮是永久性的，取自其他人或动物的植皮是暂时性的，是在创面愈合过程中为保护创面而采取的措施，10～14天后就要被身体排斥。 如果一个大面积烧伤的病人来说，自体皮肤有限，其他渠道的皮肤来源不足。如何才能获得大量的自体健康皮肤？2021/7/27 星期二“人耳鼠”再出风头 2001年，一只特别的活老鼠在北京引起轰动——这是有着一对红眼睛的、尾巴长长的、浑身没毛的小白鼠。值得一提的是，这只小白鼠的背上，竟长着一只几乎与身子一般大小的“人耳”。这只老鼠背上的“人耳”是由上海市第九人民医院副院长、整复外科主任曹谊林教授利用组织工程技术复制出来的。 人耳鼠 在京展出的数天，尽管门票高达20元，但还是有将近20万人，心甘情愿地掏钱一睹“人耳鼠”的风采。 人耳鼠的出现，透露了怎样的信息？2021/7/27 星期二动物细胞培养和核移植技术2021/7/27 星期二一、动物细胞培养 1.发展历史: 20世纪初，人们不知道神经纤维是由神经细胞的细胞质向外突出形成的，还是由神经细胞周围的其他细胞融合而成的。生物学家们就这个问题展开了激烈的争论。1907年，美国生物学家哈里森(Harrison)从蝌蚪的脊索中分离出神经组织，把它放在青蛙的凝固的淋巴液中培养。蝌蚪的神经组织存活了好几周，并且从神经细胞中长出了神经纤维。哈里森的实验不仅解决了神经纤维的起源问题，而且开创了动物组织培养的先河。此后，在许多科学家的不懈努力下，动物组织培养不断改进并逐渐发展成为动物细胞培养。2021/7/27 星期二2、动物细胞培养的应用和概念： 动物细胞培养就是从动物有机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖.2021/7/27 星期二动物细胞的培养过程剪碎组织的目的？取动物器官和组织 胰蛋白酶处理的目的？幼龄动物剪碎组织胰蛋白酶处理单个细胞细胞培养动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础2021/7/27 星期二2021/7/27 星期二动物胚胎或幼龄动物的组织、器官50代细胞遗传物质未改变细胞株细胞系遗传物质已改变3、动物细胞培养过程：胰蛋白酶动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质，将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。（分解弹性纤维）单个细胞加培养液细胞悬浮液原代培养10代细胞传代培养2021/7/27 星期二无限传代有关概念原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。（分装前的细胞培养）传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养。2021/7/27 星期二有关概念　细胞株：传代培养的细胞一般传至10代左右细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞存活到40~50代，这种传代细胞为细胞株。 细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。 细胞株和细胞系的区别： 细胞系的遗传物质改变，具有癌细胞的特点，失去接触抑制，容易传代培养。2021/7/27 星期二动物组织细胞培养要求一 体外培养特点: 大多数动物细胞要附在物体上表面生长，动物细胞培养对营养要求更严格，除氨基酸、维生素、盐类、葡萄糖外，还需要血清。对环境适应性差，对环境敏感，包括：PH、溶解氧、温度、剪切力等比微生物要求更高。2021/7/27 星期二二 培养工具:培养瓶、培养皿、培养管、多孔培养板等。细胞培养以玻璃器皿为主。器皿应选择透明度好、无毒、中性硬度玻璃制品。2021/7/27 星期二　根据培养细胞种类要求不同培养瓶的形态各异，用于细胞传代培养的细胞要求瓶壁厚簿均匀，便于细胞贴壁生长和观察，瓶口要大小一致，口径一般不小于1cm，允许吸管伸入瓶内任何部位。　/newproductZ060J2J9G7W32FR13829.htm 2021/7/27 星期二三、培养条件细胞在体外培养中所需的条件与体内细胞基本相同。【讨论】多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中，讨论以下问题：1.体外培养细胞时需要提供哪些物质？ 提示：充足的营养供给、适宜的温度、适宜的pH和气体环境。2.体外培养的细胞需要什么样的环境条件？ 提示：无菌、无毒的环境。2021/7/27 星期二1）恒定的温度:37 ℃，　维持培养细胞旺盛生