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辽细辛精油不同馏分杀虫活性比较(农学毕业论文资料)
文档信息
:
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目录
TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1
正文 1
文1:辽细辛精油不同馏分杀虫活性比较 1
文2:春夏两季杨梅树叶部精油成分及抗氧化活性比较 7
1 材料与仪器 8
2 方法 9
3 结果 11
参考文摘引言: 14
原创性声明(模板) 15
文章致谢(模板) 16
正文
辽细辛精油不同馏分杀虫活性比较(农学毕业论文资料)
文1:辽细辛精油不同馏分杀虫活性比较
DOI:/-.025
辽细辛(Asarum heterotropoides Fr. Schmidt var. mandshuricum(Maxim)Kitag.)为马兜铃科多年生草本植物,又名北细辛、万病草、细参、烟袋锅花、东北细辛,属于重要的中草药,主产于中国东北,一直供应全国及出口,在国际市场上享有盛名[1]。细辛的药用部位为根及根茎,其主要的有效成分为挥发油即细辛精油[2,3],近年来,它在农业生产上的价值也逐步显现。很多研究表明,细辛精油对昆虫可表现出不同程度的引诱、拒食、驱避、抑制生长发育及直接毒杀作用,具有良好的杀虫抑菌活性[4,5]。但研究限于未分离的细辛精油或主要单一成分如细辛醚等,而对于辽细辛精油不同馏分的杀虫活性鲜见报道。本研究采用超临界CO2萃取法提取了辽细辛精油,采用硅胶柱层析进行分离,同时使用气相色谱-质谱法(GC-MS)进行指纹图谱分析,以小菜蛾3龄幼虫和淡色库蚊3龄幼虫作为供试昆虫,比较了各馏分的杀虫活性,为研究和开发新型植物源杀虫剂提供依据。
1 材料与方法
1.1 试验材料
供试植物样品辽细辛的根购买于同仁堂药房,将其进一步阴干,粉碎,过380 μm孔径筛。供试昆虫包括粘小菜蛾(Plutella xylostella)3龄幼虫和淡色库蚊(Culex pipiens pallens)3龄幼虫,均由沈阳化工研究院新药生测实验室提供。
1.2 试验方法
1.2.1 气相色谱条件 石英毛细管柱HP-5MS,50 m×0.25 mm×0.25 μm;程序升温:首先以8 ℃/min升至120 ℃,再以2 ℃/min升至150 ℃,最后以10 ℃/min升至280 ℃;载气:He;柱流量:0.9 mL/min;进样量:1 μL;进样口温度:250 ℃;接口温度:230 ℃;柱压:80 kPa;分流比:10∶1。
1.2.2 质谱条件 离子源为EI;电离能:70 eV;离子源温度:230 ℃;质谱扫描范围:50~500 amu;扫描周期:1 s。
1.2.3 精油提取方法 准确称取样品1.85 kg,装入5 L的萃取罐内,采用超临界CO2进行萃取,萃取条件:压力20 MPa,温度40 ℃,流量20 kg/h;解析釜I压力6~7 MPa,温度45 ℃;解析釜II压力5~6 MPa,温度35 ℃,萃取时间为60 min,每20 min收集提取物称量,密封,置4 ℃冰箱中保存备用。
1.2.4 辽细辛精油的图谱分析 将所得到的辽细辛精油用乙酸乙酯溶解后进行GC-MS分析鉴定。
1.2.5 硅胶柱层析分离 采用硅胶柱层析法对超临界CO2萃取法得到的细辛精油进行了分离。柱长50 cm,直径5 cm。硅胶为青岛海洋化工厂分厂生产,型号为粗孔ZCX-Ⅱ,粒度109~152 μm。装好柱后,将10 mL精油从最上端倒入,等精油被硅胶吸附后,用石油醚与乙酸乙酯的混合液进行洗脱,石油醚与乙酸乙酯的比例依次为8∶1、6∶1、4∶1、2∶1和1∶1。用20 mL指形管接洗脱液,指形管事先编号,同时跟踪试样洗脱情况,即每接1管洗脱液,用毛细管吸取少量点滴在层析板上,在紫外灯下观察显色情况。最后将显色的洗脱液全部点滴在层析板上进行层析,根据层析情况,合并洗脱液。
1.2.6 杀虫活性测定方法 采用叶碟法测定辽细辛精油对小菜蛾幼虫的活性。挑选长势良好、无药的甘蓝嫩叶,用湿布擦干净,再将甘蓝嫩叶用打孔器打成直径2 cm的叶碟,放到直径6 cm铺有滤纸的培养皿中,1皿1个叶碟,编号。用喷雾器将细辛精油药液(浓度分别为4 000、3 000、2 000、1 000和500 mg/L)喷在叶碟上,正反面喷均匀,用药量约0.5 mL,自然晾干。然后接入供试小菜蛾幼虫10头,3 次重复,于24 h调查试虫的死亡率,计算LC50。以喷含吐温-80的蒸馏水为对照。采用浸渍法测定辽细辛精油对淡色库蚊幼虫的杀伤作用。先将24孔培养板编号,分别在孔中加入带有蚊幼虫20条左右的水1.2
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