细胞融合与单克隆抗体.pptxVIP

细胞融合与单克隆抗体;自学指导;1、动物细胞融合的概念是什么？ 2、动物细胞融合的原理是什么？诱导动物 细胞融合的方法有哪些？ 3、抗体是由何种细胞产生的？ 4、一个Ｂ淋巴细胞(浆细胞)能分泌多种抗 体不？ 5、融合后培养液中有几种细胞？ 6、如何筛选出杂交瘤细胞,杂交瘤细胞有 何优点？;先学 ;1、动物细胞工程技术的基础是:(　　) A、动物细胞融合 B、胚胎移植 C、动物细胞培养 D、核移植 ２、在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中,正确的是(　　) A、结果是相同的 B、杂种细胞的形成过程基本相同 C、操作过程中酶的作用相同 D、诱导融合的手段相同 ;3、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织,其主要原因是如此的组织细胞 (　 )　 A、容易产生各种变异 B、具有更强的全能性 C、取材十分方便 　　 D、分裂增殖的能力强 4、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合,得到杂交细胞,经培养可产生大量的单克隆抗体,与骨髓瘤细胞融合的是( ) 　A、经过免疫的B淋巴细胞 B、没经过免疫的T淋巴细胞 C、经过免疫的T淋巴细胞 D、没经过免疫的Ｂ淋巴细胞 ;5、单克隆抗体制备过程中,骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后,要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞,在这种培养基上不能存活增殖的细胞是( ) ①淋巴细胞　 ②小鼠骨髓瘤细胞　 ③B淋巴细胞自身融合细胞　 ④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞　 ⑤杂交瘤细胞 A、②④ B、①③⑤　　 C、①②③④ 　 D、②③ ;后教 (一)更正: 1、教师公布答案、学生自改。 2、自己寻找错误原因或同桌之间小声讨论 (二)点评: 1、 关于学生讨论后不能解决的问题, 教师进行有针对性的分析和讲解 2、 评检测题,点拨知识点 ;融合的原生质体AB;一、动物细胞融合;细胞膜的流动性;仙台病毒;灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面;正在融合的 淋巴细胞与骨髓瘤细胞; 融合过程:把两个不同的动物细胞放在一起,用灭活的病毒处理细胞,它们先发生质融合,再出现核融合,进而形成杂交细胞。 融合后的杂交细胞经过有丝分裂后仍能形成两个完整的杂交细胞;动物细胞融合技术的意义;二、单克隆抗体;使用相应的抗体检测乙肝病毒——抗原;抗原决定簇: 抗原表面具有的某些特定的化学基团,能决定抗原特异性,是免疫细胞识别抗原的重要依据。 各种抗原的决定簇数目不同,同一抗原的决定簇估计有多种。; ;抗体与相应抗原特异性结合; ;血清抗体(也称多克隆抗体) 由血清中提取的抗体是由不同淋巴细胞产生的多种抗体的混合物,可达百万种以上,称为多克隆抗体。 特点:产量低、纯度低、特异性差、反应不够灵敏。; ?抗体 ?抗原 ?应答 ?抗体的不纯性 ;?如何才能得到纯的抗体? ?光纯还不行,还要大量、如何办? ?但,有问题: ?找,什么细胞能无限繁殖呢? ?思路就出来了:;;⑶细胞两两融合后,有哪些类型？ ;①细胞合成DNA有D和S两条途径,其中D途径能被氨基嘌呤阻断。 ②人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径,但一般不分裂增殖。 ③鼠骨髓瘤细胞中只有D途径,没有S途径,然而能不断分裂增殖。 您想到筛选杂交瘤细胞的方案了么？ ; 在培养液中加入氨基蝶呤,收集增殖细胞！ 加入氨基嘌呤后,使 D 合成途径阻断,仅有 D 合成途径的骨髓瘤细胞及其相互融合的细胞就不能增殖,但人淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后的杂种细胞因为能够利用淋巴细胞中的 S 途径合成DNA而增殖。; 通常采纳有限稀释克隆细胞的方法,将杂交瘤细胞多倍稀释,接种在多孔细胞培养板上培养,使每孔细胞不超过一个,再由这些单细胞克隆生长,然后检测各孔上清液中细胞分泌的抗体,那些上清液可与特定抗原结合的培养孔为阳性孔。最终选出分泌预定特异抗体的杂交细胞株进行扩大培养。;(5)如何得到大量的单克隆抗体？;单克隆抗体;; 单克隆抗体制备过程;4、单抗隆抗体的应用; ;⑵用于治疗疾病和运载药物 ①特异性强、灵敏度高 生物导弹——单克隆抗体＋抗癌药物 ②疗效高、毒副作用小 ;结合同位素的单抗;制备单克隆抗体;项目;⑶图中B为________过程, 常用_________作为诱导剂 ,该细胞继承___________的遗传特性,既能__________,又能___________ 。;感谢您的聆听！