类风湿关节炎大鼠滑膜细胞凋亡基因调控的实验研究.docxVIP

类风湿关节炎大鼠滑膜细胞凋亡基因调控的实验研究 　　摘要：目的觀察甲氨蝶呤（mtx）对类风湿关节炎（ra）大鼠滑膜细胞凋亡及细胞凋亡调控基因的影响，探讨mtx的作用机制。方法选择spf级雌性健康sd大鼠40只，每只大鼠尾根部皮下多点注射ⅱ型胶原蛋白0.2mg，造模后l0d将动物随机分为假模型组、模型组，高（30mg/kg）、中（3mg/kg）、低（0.3mg/kg）给药组，各8只。给药组每组按10ml/kgmtx灌胃，假模型组、模型组给予等量生理盐水灌胃。分离培养大鼠膝关节滑膜组织，采用流式细胞术检测细胞凋亡率，wb技术检测caspase-3、caspase-9、bax、bcl-2蛋白表达情况。结果高、中、低剂量给药组抑制大鼠足肿胀的作用均优于模型组（p<0.05），且呈剂量依赖性;各组均能不同程度诱导ra滑膜细胞凋亡，高剂量给药组与模型组及假模型组比较，诱导ra滑膜细胞凋亡更明显（p<0.05）;高剂量给药组caspase-3、caspase-9、bax蛋白表达量与模型组比较明显上调，bc1-2蛋白表达量下降（p<0.05）。结论mtx诱导风湿性关节炎大鼠滑膜细胞凋亡，其机制可能与下调bcl-2表达，上调caspase-3、caspase-9与bax表达有关。 　　关键词：关节炎，类风湿;甲氨蝶呤;细胞凋亡;滑膜;大鼠;bcl-2;caspase-3 　　中图分类号：r593.22文献标识码：adoi：10.3969/j.issn.1006-1959.2020.05.021 　　文章编号：1006-1959（2020）05-0071-03 　　abstract：objectivetoobservetheeffectsofmethotrexate（mtx）ontheapoptosisofsynovialcellsandapoptosis-regulatinggenesinratswithrheumatoidarthritis（ra），andtoexplorethemechanismofactionofmtx.methods40spffemalehealthysdratswereselected.eachratwasinjectedsubcutaneouslywith0.2mgoftypeⅱcollagenatthesubcutaneouspoint.onthe10thdaftermodeling，theanimalswererandomlydividedintoashammodelgroup，amodelgroup，ahigh（30mg/kg），amedium（3mg/kg），andalow（0.3mg/kg）administrationgroup.eachgroupconsistedof8rats.eachdosegroupwasadministratedwith10ml/kgmtx.theshammodelgroupandmodelgroupweregiventhesameamountofnormalsaline.thekneesynovialtissueofratswasisolatedandcultured，andtheapoptosisratewasdetectedbyflowcytometry，andtheexpressionofcaspase-3，caspase-9，bax，bcl-2wasdetectedbywbtechnology.resultsthehigh，mediumandlowdosegroupswerebetterthanthemodelgroupininhibitingtheswellingoftherats'feet，thedifferencewasstatisticallysignificant（p<0.05）andwasdose-dependent;eachgroupcouldinducerasynovialcellstovaryingdegreesapoptosis，comparedwiththemodelgroupandthepseudo-modelgroup，thehigh-doseadministrationgroupinducedapoptosisofrasynovialcellsmoresignificantly（p<0.05）;thehigh-doseadministrationgroupexpressedcaspase-3，caspase-9，andbaxproteinswiththemodelgroupwassignificantlyup-regulated，andtheexpressionofbc1-2proteindecrease