基因工程的基本步骤.pptxVIP

基因工程的基本操作程序;独立自学：阅读教材P8-10思考：;引导探究：;基因工程的基本操作程序 第二课时;独立自学：阅读教材P10-15思考：;引导探究：;归纳: 基因工程的基本操作程序;;一、目的基因的获取;1、从基因文库中直接获取;提取某种生物的全部DNA;某种生物的单链mRNA; ;四种脱氧核苷酸(dNTP) ;目的基因的mRNA;二、基因表达载体的构建 ——基因工程的核心;2、基因表达载体的组成：;启动子：位于基因的首端的一段特殊的DNA片断，它是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出mRNA，最终获得蛋白质 终止子：位于基因的尾端的一段特殊的DNA片断，能终止mRNA的转录 标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将有目的基因的细胞筛选出来;①载体与表达载体的区别：二者都有标记基因和复制原点两部分DNA片段。表达载体在载体基础上增加了目的基因、启动子、终止子三部分结构 ②用到的工具酶：既用到限制酶切割载体，又用到DNA连接酶将目的基因和载体拼接，两种酶作用的化学键都是磷酸二酯键 ③启动子、终止子对于目的基因表达必不可少 ④目的基因不能单独进入受体细胞，必需以表达载体的方式携带进去。;三、将目的基因导入受体细胞;检测—;1、将目的基因导入植物细胞的方法： （1）农杆菌转化法 ①农杆菌特点：;③过程：;2、将目的基因导入动物细胞 ①方法：显微注射法 ②程序： ; 3、将目的基因导入微生物细胞 ①原核生物特点：繁殖快、单细胞、遗传物质少 ②方法：;（一）、检测;第27页/共30页;（二）、鉴定（个体生物学水平）;;感谢您的观看！