植物器官和组织培养.pptVIP

2、茎尖培养脱毒的基本原理： 病毒在植物体内的分布具有不均匀性 第三十页，共四十五页。 1934年，White通过观察烟草根系，首先发现病毒在植物的不同区域分布是不均匀的，越靠近根尖区病毒越少，根冠区不含病毒。 1949年，Limasset和Cornnet提出了茎的分生组织区也应存在与根尖分生组织区同样的病毒分布特征。 1952年，Morel 和Martin首先利用马铃薯茎尖分生组织进行离体培养获得了无病毒苗，证实了这种理论。同时也获得了大丽花的无病毒苗。并建立了茎尖组织培养的繁殖体系。 第三十一页，共四十五页。 外植体选取—热处理钝化病毒—分生组织培养 | 形成茎、根 | 再生完整植株 | 病毒检测 | 扩繁 — 进一步检测病毒 — 移栽—获得脱毒植株 3、茎尖培养脱毒基本技术规程： 第三十二页，共四十五页。 第四章 植物器官和组织培养 2006年10月 第一页，共四十五页。 植物器官培养（Organ Culture）是指对植物某一器官的全部或部分或器官原基进行离体培养的技术。分为营养器官（根、茎、叶）和繁殖器官（果实、种子、花器官）培养。 组织培养指对植物组织（分生组织、表皮组织、薄壁组织）及愈伤组织进行离体培养的技术。 第二页，共四十五页。 植物器官和组织培养的基本程序 植物营养器官培养 植物繁殖器官培养 植物组织培养及脱毒苗的生产 第三页，共四十五页。 第一节 植物器官和组织培养的基本程序 基本程序： 一、无菌外植体的获得 二、初代培养物的建立 三、形态发生和植株再生 四、培养产物的观察记载 第四页，共四十五页。 一、无菌外植体的获得 1、茎尖、茎段、叶片的灭菌 2、根、块茎、鳞茎的灭菌 3、花蕾的灭菌 4、果实、种子的灭菌 清洗外植体 利用灭菌剂对外植体灭菌 无菌水冲洗3-5次 主要过程： 第五页，共四十五页。 第六页，共四十五页。 二、初代培养物的建立 （一）无菌环境 （二）规范操作 （三）条件合适 第七页，共四十五页。 三、形态发生和植株再生 具根茎的两极器官 单极器官 先茎后根 先根后茎 器官化途径 体胚途径 愈伤组织 外植体 植株 植株 植株 植株 第八页，共四十五页。 四、培养产物的观察记载 （一）愈伤组织 诱导率=产生愈伤的外植体 数/外植体总数 （二）胚状体 诱导率的计算 （三）芽 芽分化率的计算 （三）根 发根率=发根芽数/培养芽数 第九页，共四十五页。 第二节 植物营养器官培养 根段培养 茎段培养 叶培养 第十页，共四十五页。 植物叶培养是指以离体的叶片器官为外植体进行培养，再生植株的过程。植物叶培养常用于研究叶形态发生过程以及进行光合作用、叶绿素形成、遗传转化等。 培养过程主要包括：愈伤组织诱导；不定芽分化；无菌苗增殖及生根等。 一、植物叶培养 第十一页，共四十五页。 叶片离体培养过程 第十二页，共四十五页。 A B E C 花烛叶片离体培养及植株再生 第十三页，共四十五页。 （一）愈伤组织诱导： 诱导接种的叶片外植体脱分化形成愈伤组织的过程。愈伤组织的形成通常经历诱导期、分裂期和分化期等阶段。 高浓度生长素及适当浓度的细胞分裂素可以促进愈伤组织的形成。 第十四页，共四十五页。 （二）不定芽的分化： 由脱分化形成的愈伤组织细胞分化出不定芽及不定根的过程。 分化过程受细胞分裂素/生长素比值的影响。通常添加高浓度的细胞分裂素，降低生长素浓度以诱导不定芽的形成。 第十五页，共四十五页。 （三）不定芽的增殖及生根： 分化形成的不定芽切下后，接种于增殖培养基中，促进不定芽的增殖，增殖的无根苗转接于生根培养基中可以诱导不定根的形成。 第十六页，共四十五页。 二、植物根段培养 植物根段培养是指以植物的根切段为外植体进行离体培养，再生完整植株的过程。是研究根系生理代谢、器官分化及形态建成的良好实验体系。培养方法与叶片培养相似。 培养过程包括愈伤组织诱导、不定芽分化、无菌苗的增殖与生根等。 第十七页，共四十五页。 大蒜根尖培养及植株再生 第十八页，共四十五页。 植物茎段培养是指对植物的带有定芽或不定芽的外植体进行离体培养，再生完整植株的过程。 茎段培养是植物离体快繁的主要途径。易培养、变异小、性状均一、繁殖速度快。（下节课讲解） 三、植物茎段培养 第十九页，共四十五页。 第三节 植物繁殖器官培养