木质素过氧化物酶（Lip）活性检测试剂盒说明书__紫外分光光度法UPLC-MS-4257.pdf

木质素过氧化物酶 （ ）活性检测试剂盒说明书 Lip 紫外分光光度法 注意 ：本产品试剂有所变动 ，请注意并严格按照该说明书操作 。 UPLC-MS-4257 货号 ： 50T/48S 规格 ： 产品内容 ：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致 ，有疑问请及时联系工作人员 。 试剂名称 规格 保存条件 试剂一 液体 85mL×1瓶 2-8℃保存 试剂二 液体 11mL×1瓶 2-8℃保存 试剂三 液体 6mL×1瓶 2-8℃保存 产品说明 ： 木质素过氧化物酶 （EC4） （Lip）是一种含亚铁血红素的过氧化物酶，是木质素的生物降解过程中的 主要木质素降解酶类。Lip 在饲料资源开发以及废水、废物处理领域有着广阔的应用前景。 藜芦醇可以被 Lip 催化发生氧化反应，其产物藜芦醛在 310nm 处有最大吸收峰，以藜芦醇为反应底物，通过 测定310nm 处藜芦醛的吸光值，可以判定 Lip 的酶活性。 Lip VeratrylAlcohol Veratraldehyde (310nm) 注意 ：实验之前建议选择2-3 个预期差异大的样本做预实验 。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者 增加样本量进行检测 。 需自备的仪器和用品 ： 紫外分光光度计、低温离心机、水浴锅/恒温培养箱、可调式移液器、超声波细胞破碎仪、研钵/匀浆器、1mL 玻璃比色皿、冰和蒸馏水。 操作步骤 ： 一 、样本处理 （可适当调整待测样本量 ，具体比例可以参考文献 ） 1、组织：按照样本质量 （g）：试剂一体积 （mL）为1:5~10 的比例 （建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 试剂 一）加入试剂一，冰浴匀浆；10000g4℃离心 10min，取上清置冰上待测。 4 2、细菌或细胞样本：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清，按照细菌或细胞数量 （10 个）：试剂一 体积 （mL）为 500~1000:1 的比例 （建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 试剂一）加入试剂一，超声波破碎细菌或 细胞 （冰浴，功率 300W，超声 3s，间隔 7s，总时间 3min），10000g4℃离心 10min，取上清置冰上待测。 3、培养液或其他液体：直接检测。若溶液浑浊则离心后取上清进行测定。 二 、测定步骤 1、可见分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 310nm，蒸馏水调零。 2、测定前根据实验用量取出部分试剂一、试剂二、试剂三置于 37℃预热 10min 以上。若一次性测定样本过多， 可根据使用量将试剂一、二、三按6:2:1 比例配成工作液后进行预热，测定时按照 100μL 样本+900μL 工作液加入 1mL 玻璃比色皿进行测定。 3、加样表 （在 1mL 玻璃比色皿中依次加入下列试剂)： 电话：400-998-2324 邮箱：service_uplc_ms@163.com 网址： 本产品仅供科学研究使用！请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途！-上海液质检测技术有限公司 1 2 第 页共 页 试剂名称 （μL） 测定管 试剂一 （μL） 600