滤纸酶（FPA）活性检测试剂盒说明书__可见分光光度法UPLC-MS-4228.pdfVIP

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2022-09-18 发布于上海
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滤纸酶（FPA）活性检测试剂盒说明书__可见分光光度法UPLC-MS-4228.pdf

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滤纸酶（FPA ）活性检测试剂盒说明书可见分光光度法 UPLC-MS-4228 50T/24S 试剂名称规格保存条件试剂一液体 35mL×1瓶 2-8℃保存试剂二液体 60mL×1瓶 2-8℃保存滤纸条 50mg×50条常温保存标准品粉剂×1支 2-8℃保存溶液的配制： 1. 滤纸条：常温防潮保存。 2. 标准品：10mg 无水葡萄糖。临用前加入 1 mL 蒸馏水溶解，配成 10 mg/mL 葡萄糖溶液备用，2-8℃保存两周。纤维素酶是降解纤维素生成葡萄糖一类酶的总称，它不是单体酶，而是起协同作用的多组分酶系。以不溶性纤维素如滤纸为底物测定的纤维素酶称为滤纸酶，研究滤纸酶活力对纤维素酶总体酶活力的研究的有着重要意义。 FPA水解滤纸产生还原糖，还原糖与 3,5 -二硝基水杨酸反应生成在 540nm 有特征吸收峰的棕红色物质，通过测定540nm 处吸光值变化可计算得 FPA活性。 Filter FPA Reducing Sugar ReducingSugar+3,5-DinitrosalicylicAcid 3-Amino-5-Nitrosalicylate （540nm）注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。可见分光光度计、台式低温离心机、水浴锅、1mL 玻璃比色皿、超声破碎仪、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水、EP 管（2mL）。一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献） 1. 组织：按照质量（g）﹕蒸馏水体积(mL)为 1 ﹕5~10 的比例（建议称取约 0.1g，加入 1mL 蒸馏水）加入蒸馏水，冰浴匀浆后于 4℃，12000rpm 离心 10min，取上清置于冰上待测。 4 2. 细胞或细菌：先收集细胞或细菌到离心管中，离心后弃上清；按照细胞或细菌数量（10 个）﹕蒸馏水体积（mL）为 500~1000 ﹕1 的比例（建议 500 万细胞或细菌加入 1mL 蒸馏水），冰浴超声波破碎细胞或细菌（功率 300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后4℃，12000rpm 离心10min，取上清置于冰上待测。 3. 培养液或其它液体：直接检测。（若溶液有浑浊则离心后取上清进行测定）二、测定步骤电话：400-998-2324 邮箱：service_uplc_ms@163.com 网址：本产品仅供科学研究使用！请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途！-上海液质检测技术有限公司 1 3 第页共页 1、分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 540nm，蒸馏水调零。 2、将10mg/mL 标准液用蒸馏水稀释为 0.8、0.6、0.5、0.4、0.3、0.2mg/mL 的标准溶液备用。 3、标准品稀释表序号稀释前浓度（mg/mL）标准液体积（µL）蒸馏水体积（µL）稀释后浓度（mg/mL） 1 10 200 1800 1 2