土壤碱性磷酸酶（S-AKP_ALP）活性检测试剂盒说明书__微量法UPLC-MS-4053.pdf

土壤碱性磷酸酶 （S-AKP/ALP）活性检测试剂盒说明书 微量法 注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。 货号：UPLC-MS-4053 规格：100T/96S 产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。 试剂名称 规格 保存条件 试剂一 液体 42mL×1瓶 2-8℃保存 试剂二 粉剂×1瓶 2-8℃保存 试剂三 液体 2.5mL×1瓶 2-8℃保存 试剂四 粉剂×2 支 2-8℃保存 标准品 液体 1mL×1支 2-8℃保存 溶液的配制： 1. 试剂二：临用前加 100mL 蒸馏水充分溶解，2-8℃保存 8周； 2. 试剂四：临用前取1支加576 μL 无水乙醇 （自备），24 μL 蒸馏水充分溶解。用不完的试剂2-8℃保存一 周 （变褐色后不能再使用，一瓶即可以实验 100T，为延长反应时间故多给一瓶）； 3. 标准品：0.5μmol/mL 苯酚标准液。 产品说明： 土壤磷酸酶是一类催化土壤有机磷矿化的酶，其活性的高低直接影响着土壤中有机磷的分解转化及其生物有 效性，是评价土壤磷素生物转化方向与强度的指标。土壤磷酸酶受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和 pH 显著影 响，根据最适 pH 范围，通常分为酸性、中性和碱性三种类型。 碱性环境中，S-AKP/ALP催化磷酸苯二钠水解生成苯酚和磷酸氢二钠，通过测定酚的生成量即可计算出 S-AKP/ALP活性。 - S-AKP/ALP，OH PhenylDisodiumPhosphate Phenol+Na HPO 2 4 Alkalineconditions Phenol+2,6-DibromobenzoquinoneChlorimide Indoxyl (660nm) 注意：实验之前建议选择 2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者 增加样本量进行检测。 需自备的仪器和用品： 分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、台式离心机、水浴锅/恒温培养箱、分析天平、可调式移液器、 冰、研钵、蒸馏水、30-50 目筛、乙醇和甲苯 （不允许快递）。 操作步骤： 一、样本处理 （可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献） 电话：400-998-2324 邮箱：service_uplc_ms@163.com 网址： 本产品仅供科学研究使用！请勿用于临床、诊断、食品、化妆品检测等用途！-上海液质检测技术有限公司 1 2 第 页共 页 1. 新鲜土样自然风干或 37℃烘箱风干，过 30~50 目筛。 2. 称取风干混匀土壤约 0.1g，加入 0.05mL 甲苯 （自备），轻摇 15min；加 0.4mL 试剂一并且摇匀后，置于 37℃水浴锅/恒温培养箱，开始计时，催化反应 24h；到时后迅速加入 1mL 试剂二充分混匀，以终止酶催化的反应。 10000rpm 室温离心 10min，取上清液置于冰上待测。 二、测定步骤 1. 分光光度计/酶标仪预热 30min 以上，调节波长到 6