复原乳的检测及含量测定.docxVIP

复原乳检测及含量测定实验原理 在弱碱性环境下，乳酸脱氢酶催化乳酸形成丙酮酸，同时使氧化 型辅酶I ( N A D + )受氢形成还原型辅酶I (NADH)。还原型辅酶I 在340nm波长处吸光度的增加与乳酸脱氢酶的活性呈正比。用乳酸脱 氢酶测定试剂盒分别测定的不同含量复原乳中还原型辅酶I吸 光度的变化率，做标准曲线，再测定需检测的样品中还原型辅酶I的 吸光度的变化率，即可反映出复原乳中乳酸脱氢醐的不同活性，从而 鉴别液态奶中复原乳的含量。 实验材料纯的液态奶、复原乳、乳酸脱氢酶测定试剂盒、紫外可见分光光度计 实验步骤 1、用液态奶和复原乳配制五组标准液，其中复原乳的含量分别为0、 10%、 20%、 40%、 80%o 2、用乳酸脱氢酶测定试剂盒分别测定标准液中的吸光率的变化率。 具体的测定方法：分别取标准奶样40 uL和乳酸脱氢酶试剂 l(Rl)1600pL充分混合在37℃保温5min,再加入乳酸脱氢酶试剂 2(R2)400 u L充分混合37c保温5min,以蒸储水取代乳样作为参照在 340nm处开始测定7min内吸光度的变化值，每分钟记录一次。分别 计算各标准液的吸光度变化率(△A/min)。 3、用乳酸脱氢酶测定试剂盒测定待测样品的吸光率的变化率。 具体操作同2 实验结果 用标准液所测得的值做标准曲线，并得到线性关系，将样品所测得 值带入其中，求的样品中所含的复原乳的含量。