细胞培养过程中的污染.docxVIP

细胞培育过程中的污染不仅仅指微生物，而且还包括全部混入培育环境中的、对细胞生存有害或造成细胞不纯的物质，包括生物和化学物质。培育细胞受细菌污染后，会消失培育液变混浊，pH转变。也有的培育液肉眼观看无多少转变，只能在镜下发觉菌体才知污染。所以，每天应认真观看。污染后细胞发生病理转变，胞内颗粒增多、增粗，最终变圆脱落死亡，造成试验失败和细胞株(系)丢失。??培育细胞受真菌污染后，可见培育液中漂移着白色或浅黄色的小点，有的散在生长，培育液一般不发生混浊；倒置显微镜下可见丝状、管状或树枝状的菌丝纵横交叉在细胞之间或培育基中，有的呈链状排列。念珠菌和酵母菌呈卵圆形散在细胞周边和细胞之间。个体细小，有增多趋势。镜下看时，要将培育瓶用酒精棉球擦洁净，以防止与瓶外尤其瓶底外面生长的菌丝相混淆。真菌污染后，细胞生长变慢，但最终由于养分耗尽及毒性作用而使细胞脱落死亡。??支原体是介于细菌与病毒之间能独立生活的最小微生物，最小直径0.2μm，一般过滤除菌无法去除它，光镜下难以看清它的形态结构。开头不易发觉，能在偏碱条件(pH7.6～8.0)下生存，对青霉素有抗药性，多吸附于细胞表面或散在于细胞之间。电镜下可见其有三层结构，无细胞壁，中心有电子密度大的密集颗粒或丝状的中心囊。??培育细胞受支原体污染后，部分敏感细胞可见细胞生长增殖变慢，部分细胞变圆，从瓶壁脱落。但多数细胞污染后无明显变化，或略有变