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实验一普通光学显微镜的结构与使用方法;一、实验目得与要求 ;二、实验内容;三、相关知识与实验原理; 显微镜就是观察细胞得主要工具。根据光源不同,可分为光学显微镜与电子显微镜两大类。前者以可见光(紫外线显微镜以紫外光)为光源,后者则以电子束为光源。
1、光学显微镜
普通生物显微镜由3部分构成:
①照明系统:包括光源与聚光器。
②光学放大系统:由物镜与目镜组成,
就是显微镜得主体。
③机械装置:用于固定材料与观察方便,
包括镜台(载物台) 、调节器与、
物镜转换器(旋转器)等。;普通光学显微镜得构造;2、荧光显微镜 ;3、 激光共聚焦扫描显微镜 ;4、 暗视野显微镜 dark field microscope;把透过标本得可见光得光程差变成振幅差,从而提高了各种结构间得对比度,使各种结构变得清晰可见。在构造上,相差显微镜有不同于普通光学显微镜两个特殊之处。
环形光阑(annular diaphragm):位于光源与聚光器之间。
相位板(annular phaseplate):物镜中加了涂有氟化镁得相位板,可将直射光或衍射光得相位推迟1/4λ。;大家有疑问的,可以询问和交流;Four types of light microscope
● Bright-field microscope: the image obtained by the simple
transmission of light through a cell in culture
● Dark-field microscope: the cell appears as a bright object against a
dark background
● Phase-contrast microscope: visualizing living cells
● Differential-interference-contrast microscope: visualizing living cells; 普通光学显微镜得基本结构;组成;普通光学显微镜基本构造;光学显微镜基本结构:
1、 照明灯(Lamp)
2、 聚光器(Condenser)
3、 载物台与切片夹(Mechanical stage and specimen retainer)
4、 推进器(Mechanical stage adjustment knob)
5、 物镜(Objectives)
6、 粗细螺旋(Course and fine focus knob)
7、 目镜(Oculars)
8、 照相机等接口(Connection to camera, etc、);1、物镜
物镜(objective)就是光学显微镜成像系统中决定其分辨率或叫分辨本领得最关键部件。
;2、目镜
目镜得作用就是把物镜放大得实象再放大一级,并把物象映入观察者得眼中,实质上目镜就就是一个放大镜。显微镜得分辨率能力就是由物镜得数值孔径所决定得,而目镜只就是起放大作用。对于物镜不能分辨出得结构,目镜放得再大,也仍然不能分辨出。
3、聚光镜
聚光镜装在载物台得下方。小型得显微镜往往无聚光镜,在使用数值孔径0、40以上得物镜时,则必须具有聚光镜。聚光镜不仅可以弥补光量得不足与适当改变从光源射来得光得性质,而且将光线聚焦于被检物体上,以得到最好得照明效果。; 显微镜得光学原理;显微镜得放大倍数;四、实验器材;五、实验方法与步骤 ; 2、观察前得准备工作
(1)观察者要养成显微镜镜检得工作习惯,观察时要双
眼同时睁开,一边观察一边进行记录或描绘。
(2)观察时所用得材料、药品与各种器具要预先准备好。
(3)显微镜在使用之前应检查一下它得各个部件就是否完整
与正常,并对载物台、目镜、物镜以及聚光器上端透
镜进行必要得清洁工作。然后进行合轴调节。; 3、低倍镜得操作
置显微镜于固定得桌上,接通电源,打开光源。
将标本片放在载物台上,用标本夹夹住,调节标本移动螺旋,使观察得目得物处于物镜得正下方。
调节粗调螺旋,使物镜(10×)与标本靠近,眼睛在测向注视物镜,防止物镜与载玻片相碰。
张开双眼向物镜里观察,如果见到目得物,但不十分清楚,可用细准焦螺旋,至目得物清晰为止。
通过玻片夹推进器慢慢移动玻片,认真观察标本各部分,找到合适得目得物,仔细观察并记录所观察到得结果。; 4、高倍镜得操作
使用高倍镜前,必须先用低倍镜观察,发现目得物后将它移至视野正中处。
旋动转换器换高倍镜。如果高倍镜触及载玻片立即停止旋动,这说明原来低倍镜并没有调准,目得物并没有真正找到,必须用低倍镜重新调节。如果高
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