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- 2022-10-15 发布于四川
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Western Blot技术专辑之胶电泳和转膜
倒胶的仪器我们在前面WesternBlot仪器之选已经介绍过了,除了顺手的工具能防止漏 胶,配胶的试剂和配方比例对电泳结果的质量固然有打算性的影响,这个配胶的比例,在 《分子克隆》上有具体的论述,信任大家都不难查到。简洁无视的问题主要在于过硫酸镂 (AP)肯定要颖一一最好用小指管配AP (写日期〕保存在-20度,超过2周的AP扔掉算了, 或者已经反复翻开使用屡次的AP都别用,小气病发作的后果往往是得不偿失——胶凝不好多半是这里疏忽〔或者混合不匀),由于相对配胶的其他组分,AP算最活泼分 子一一假设还有诸如漏加某组分或者配比错误或者Buffer搞错,那确定是你自己找骂,不 值得怜悯。水要用去离子的纯水,MilliQ级更好。Cambrex(原来的FMC)有商品化的丙烯酰胺 母液,很贵,也很好一一配出的胶对200KD以上的蛋白的区分率高于一般 胶,条带清楚秀丽, 惋惜始终没有搞清楚配方的奇特;但是数十倍于丙烯酰胺粉剂的价格令人却步,不过,对接触丙烯 酰胺粉尘严峻过敏的人可以选择这个。更加豪华的选择是已经凝好的预制胶,各种配方各种 比例各种梳孔大小多少任君选择,翻开即用,固然更直接便利,更吸引人的是结果秀丽,区 分率高,特别是重复性好,条带真正是“razor sharp 啊!寻常都能用这么豪华的东西心情 固然超爽啊,试验紧凑又轻松,效率也更高
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