三节聚合酶链反应.ppt

第三节 聚合酶链反应（polymerase chain reaction,PCR） ;PCR;原 理：;PCR扩增;PCR特点及应用：;PCR相关技术： ;2. 巢式PCR（nest PCR）;在同一PCR体系中加入数对PCR引物，如果这些引物的退火温度相近，并且所覆盖的区域不重叠，这样的反应体系可同时扩增多个DNA片段。 多重PCR常用来检测同一基因的多个外显子的缺失，或在检测缺失设置内对照。;4.RT-PCR;RT-PCR;RT-PCR;五、单链构象多态性（Single Strand Conformation Polymorphism, SSCP） ;PCR-SSCP过程：;第二节??? DNA多态;DNA分析中常用的多态性标记有3类：;一、序??多态（或点多态）;Allele II 产生了新的酶切点 ;AlleleII酶切位点消失 ;二、序列长度多态性（或数目变异串联重复，variable number tendom repeats, VNTR）;VNTR 酶切，电泳后的检测结果;PCR-VNTR检测;　　通常，重复单位16～28bp长，称为小卫星DNA。 重复单位２～6bp长，如（TA）n, (CGG)n等，称为微卫星DNA。　　DNA多态可以通过PCR扩增后电泳来检出，称扩增片段长度多态（amplified fragment lengt