酶动力学及影响酶反应速的因素.pptxVIP

酶动力学及影响酶反应速的因素会计学第1页/共52页一.底物浓度的影响v0[S]第2页/共52页一.底物浓度的影响对于简单的酶反应，当酶浓度和其他条件恒定时：Vmax零级反应混合级反应 该曲线可以用米氏方程 来描述一级反应第3页/共52页一.底物浓度的影响 dp/dt?k[E][S]：一级反应dp/dt?k[E]：零级反应(二) 米氏方程第4页/共52页一.底物浓度的影响 1. 米氏方程的推导 为了要解释这一现象，Michaelis Menten 提出了中间络合物学说。 该学说必须两个条件： (1)符合质量作用定律(2)形成的中间产物决定整个反应的速度(二) 米氏方程第5页/共52页一.底物浓度的影响 1. 米氏方程的推导 Michaelis Menten 提出了中间络合物学说。 K1K2E＋SESE＋PK3K4(二) 米氏方程第6页/共52页一.底物浓度的影响 1. 米氏方程的推导Michaelis-Menten的三个假设： (1)推导的v为反应初速度 对于单底物、单产物反应，其反应过程需经过中间复合物ES，即 第7页/共52页(二) 米氏方程一.底物浓度的影响 1. 米氏方程的推导 产物的生成量很少 → k4 的反应忽略不计。即第8页/共52页(二) 米氏方程一.底物浓度的影响 1. 米氏方程的推导[E]?酶总量；[Et]?反应后t时的酶量；[ES]?中间产物浓度[Et] ? [E]-[ES]第9页/共52页(二) 米氏方程一.底物浓度的影响 1. 米氏方程的推导刚反应时，若形成的速度为v,则v1?k1 [Et][S] ? k1[（E）-（ES）][S] (1)ES消失速度：v2 ?k2[ES]; v3 ?k3[ES]v23 ? k2 [ES]? k3[ES] ?（k2? k3）[ES] (2) (二) 米氏方程第10页/共52页一.底物浓度的影响 1. 米氏方程的推导Michaelis-Menten的三个假设： (2)反应体系处于稳态 第11页/共52页(二) 米氏方程一.底物浓度的影响 1. 米氏方程的推导即[ES]不变 → ES的生成量 = ES的分解量。即v1 =v23k1[（E）-（ES）][S] = [ES] （k2? k3）[（E）-（ES）][S]/ [ES] = （k2? k3）/ k1 (3)设 Km=(k2+k3)/k1 将(3)重排得[ES] =[E][S]/ Km ? [S](4)(二) 米氏方程第12页/共52页一.底物浓度的影响 1. 米氏方程的推导Michaelis-Menten 的三个假设： (3)[S] [E][E] =[ES],V = K1[E],即K1 = V/ [E] (5)同时，v = K1[ES], K1 = v/ [ES] (6)(5) + (6)[ES] =v [E] /V (7)(7)代入(4)得 v [E] /V = [E][S]/ Km ? [S] Vmax·[ S ]V =Km + [ S ]第13页/共52页(二) 米氏方程一.底物浓度的影响 1. 米氏方程的推导第14页/共52页(二) 米氏方程一.底物浓度的影响 2. 米氏方程中常数的意义Km—— 米氏常数 由于 Km= (k2+k3)/k1 ， ∴ 为复合常数。 Km是酶的特征常数，经常表示酶与底物的亲和力。 Km值越大，亲和力越小。 (二) 米氏方程第15页/共52页一.底物浓度的影响 2. 米氏方程中常数的意义 Km的值是当反应速度为最大反应速度的一半时所对应的底物浓度。 所以Km的单位为浓度单位 Km = [S] (二) 米氏方程第16页/共52页一.底物浓度的影响 2. 米氏方程中常数的意义Vmax·[ S ]V =Km + [ S ]第17页/共52页(二) 米氏方程一.底物浓度的影响 3. 米氏方程中常数的测定v-[S]作图法： Vmax难以测定，不能从v?V/2处求得，从而导致Km也难确定。所以采用双倒数作图法：即 1/v - 1/[S] 作图 Vmax·[ S ]V =Km + [ S ]第18页/共52页(二) 米氏方程一.底物浓度的影响 3. 米氏方程中常数的测定第19页/共52页二.酶浓度对酶反应速度的影响 在一般的酶促反应中，常常[S][E]，酶反应速度达到最大反应速度。 当[S][E]，由于Vmax=k[E]0，∴反应速度与酶浓度成正比。 酶浓度曲线pH影响酶分子解离状态。 极度pH的条件引起酶蛋白的变性。pH影响底物的解离，从而影响酶与底物的结合。 第20页/共52页三. pH对酶反应速度的影响 pH对酶反应速度的影响较大。其原因有： 每种酶只能在一定的pH范围内表现出它的活