软枣猕猴桃组培育苗技术规程.pdfVIP

DB**/T XXXX—XXXX 软枣猕猴桃组培育苗技术规程 1 范围 本文件规定了软枣猕猴桃 （Actinidia arguta (Sieb.Zucc)Planch.ex Miq. ）组培育苗外植体的获得和 处理、初代培养、继代培养、试管苗移植的技术要求。 本文件适用于软枣猕猴桃组培种苗的繁育。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T 8321.10 农药合理使用准则(十) DB21/T 3436 软枣猕猴桃苗木 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 inoculate 接种 是指在超净工作台上将处理好的外植体插入到准备好的培养基中。 4 外植体的获得和处理 4.1 外植体的获得 选择无病虫害、无病毒侵染、生长健壮的半木质化新梢，剪去叶片，保留部分叶柄，保存内塑料袋 里备用。 4.2 外植体的清洗与切段 将获得的外植体，用洗涤剂或洗衣粉浸泡、洗刷，剪成3 cm~5 cm长的单芽茎段，芽上留1 cm，自 来水冲洗干净备用。 4.3 外植体的消毒与接种 将外植体茎段先放入75 %的乙醇溶液中浸泡10 s~30 s后，用无菌水冲洗2次~3次，再放入2 %次氯酸 钠溶液中消毒10 min~20 min后，用无菌水冲洗5次~8次。然后进行接种，每瓶1个切段，切段一半插入 培养基内，芽露出培养基。 DB21/ T XXXX—XXXX 5 瓶内培养 5.1 初代培养 5.1.1 初代培养基 可用DKW等培养基。植物激素选用细胞分裂素（6-BA ），使用浓度范围1 mg∙L-1~3 mg∙L-1 。 5.1.2 培养条件 培养温度为24 ℃±2 ℃，光照强度3000 lx~10000 lx，光照时间12 h/d~16 h/d。待组培苗高度达到3 cm 以上，可以将小苗切断进行继代培养。 5.2 继代培养 5.2.1 继代培养基 可用DKW等培养基。植物激素选用吲哚丁酸（IBA ）0.1 mg∙L-1~1.0 mg∙L-1、细胞分裂素（6-BA ） -1 -1 1.0 mg∙L ~2.0 mg∙L 。 5.2.2 继代培养条件 培养温度为24 ℃±2 ℃，光照强度为3000 lx ~5000 lx，光照时间12 h/d~16 h/d 。待苗高生长至6 cm 以上，再进行继代繁殖，每瓶接种5个~10个外植体。 5.3 生根培养 5.3.1 生根培养基 可用半量DKW等培养基。培养基中大量元素和微量元素减半，铁盐和有机物全量。植物激素选用 吲哚丁酸（IBA ）0.1 mg∙L- 1~1.0 mg∙L- 1 。 5.3.2 生根培养条件 培养温度为24 ℃±2 ℃，光照强度3000 lx~5000 lx，光照时间10 h/d~12 h/d。待小苗生根后，高度 达到6 cm 以上，进行移植。 6 试管苗移栽 6.1 基质 炼苗基质为草炭土:河沙:珍珠岩比例为1꞉2:1 ，pH 值5.5~6.5，基质厚度8 cm~10 cm。 6.2 炼苗 移植前，将培养瓶放置在温室内，自然散射光下，封口炼苗2 d~3 d ，然后再开口炼苗2 d~3 d ，温 度控制在15 ℃~28 ℃左右，空气湿度在70 %~80 % 。 6.3 移栽 将炼苗后的小苗取出，用清水洗净根部粘附的培养基，然后移栽于苗床基质中，株行距5 cm ×8 cm， 用40 %多菌灵可湿性粉剂500倍液喷淋，温度保持在15 ℃~30 ℃。 2 DB21/ T XXXX—XXXX 6.4 移栽后管理 6.4.1 水分 移植后每天喷淋5次~10次，定植后2周~3周内相对湿度控制在80 %~100 %，当第一片新叶完全张开 后，降低湿度至70 %左右，8周~10周后相对湿度保持在60 %左右。 6.4.2 光照 移栽4周内，光照强度控制在5000 lx~10000 lx，4周后逐渐增大光照强度至5000 lx~20000 lx。 6.4.3