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聚合物的选择 絮凝聚合物与颗粒的吸附包括: 物理吸附:静电吸引,偶极吸引,范德 瓦尔力和疏水作用 化学吸附:化学键,配位键和氢键 范德瓦尔力和偶极吸引一般难于控制且无选择性 聚合物的选择 颗粒表面性质是选择絮凝聚合物的依据, 生物材料的复杂性和不确定性: 细胞和细胞碎片:电荷,多糖,蛋白,脂类 培养基残留物:固体颗粒, 代谢物: 蛋白质: 多糖: 核酸: 脂类: 聚合物的选择 絮凝聚合物: 阳离子型:去乙酰基几丁质,聚丙烯酰氨及改性物,聚2-丙烯基吡啶,聚烯胺 阴离子型:CMC,聚丙烯酸,聚马来酸丙烯酸共聚物,聚丙烯酸,海藻酸,酸性多糖, 中性:PEG, PVA,中性多糖 聚合物的选择 絮凝聚合物的用量:OFC 絮凝聚合物的的稀释度:稀释度低易造成局部浓度高,混合效果差。 聚合物分子量:聚合物分子量增大,分子链越长,絮凝能力随其也越大。 金属离子的影响 金属离子与颗粒及聚合物之间的相互作用,形成复合物可以改进絮凝效果。 金属离子是通过与之能够形成配位复合物的S>N>O(选择性)的作用。 常用的金属离子:Ca2+,Mg2+,Al3+和过渡金属离子:Cu2+,Fe2+,Zn2+。 使用的金属离子不应对目标产物的生物活性有影响。 金属离子的选择性及复合物稳定性受环境因素及颗粒、聚合物和金属离子本身性质的影响。 微生物细胞的絮凝 回收胞外产物时,进行发酵液絮凝除细胞。 影响絮凝的因素: 1. 微生物种类:与细胞表面组成及性质有关 2. 培养基组成:盐的种类和浓度,其他组分性质 3. 培养时间:不同生长期的细胞壁组成和性质不同 微生物细胞的絮凝 4. 代谢产物的种类及数量:多糖,蛋白质及其他物质 5. pH:与发酵时间有关,影响细胞表面电荷性质和数量。 6. 搅拌速度及时间:加速,混合有利;剪切破 坏絮凝,不利。 7. 温度:高温絮凝快,但絮凝物稳定性差。 微生物细胞的絮凝 直接和间接控制酵母细胞絮凝 遗传/生理因素 代谢 细胞壁 絮凝 环境因素 大肠杆菌细胞的絮凝 大肠杆菌细胞表面电荷 电泳迁移率(μcm/sec V) 0 1 3 -2 2 1 -4 2 3 -4 -3 -2 -1 log NaCl浓度(M) 在不同培养基中生长的细胞,自然pH,实线和虚线分别位洗涤和未洗涤细胞。 未洗涤细胞表面黏附有多糖和蛋白质,带有较多的电荷,等电点为pH3-4。 大肠杆菌细胞的絮凝 絮凝剂壳聚糖 上 150 清 1 浊 100 4 度 3 50 2
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