诺唯赞试剂说明书 支原体检测与清除 MycoBlue Mycoplasma Detector.pdfVIP

MycoBlueTM Mycoplasma Detector D101 Version 5.1 Vazyme biotech co., ltd. 产品简介 MycoBlueTM Mycoplasma Detector是专门针对细胞培养物的支原体快速检测试剂，其核心为Vazyme独特的等温扩增技术。MycoBlueTM Mycoplasma Detector使用非常简便，只需吸取1 μl细胞培养上清加入到反应体系中，在60°C孵育1小时。若细胞培养物被支原体污染，支 原体DNA的保守序列会被等温DNA聚合酶特异性扩增，使反应液由紫色变成天蓝色，肉眼观察，即可判定结果。无需PCR仪/qPCR仪，无 需电泳，在细胞房内就可以轻松完成。MycoBlueTM Mycoplasma Detector可检测多达28种支原体，包括细胞培养常见的8种支原体。 与常用的PCR法相比，MycoBlueTM Mycoplasma Detector对培养上清中的抑制物耐受度更强，因此不会出现弱阳性、假阴性；反应完成后 无需开盖电泳，避免了扩增产物气溶胶造成的假阳性；检测结果与目前最灵敏、最准确的定量PCR法具有极高的一致性。 TM 经验证，MycoBlue Mycoplasma Detector适用于各种悬浮、贴壁培养细胞，包括CHO，Vero，杂交瘤，Sf9 ，293等，且具有广泛的培养基、血 清兼容性，因此非常适合于生物制药企业、疫苗生产企业、单抗生产企业、细胞治疗/胚胎实验室以及科研实验室的日常支原体检测。 产品组成 组 分 D101-01 20 tests D101-02 50 tests MycoBlueTM A a 480 μl 1.2 ml MycoBlueTM B b 20 μl 50 μl Positive Control 10 μl 25 μl 石蜡油 500 μl 1.25 ml a. 包含Buffer, 显色剂。 b. 包含等温聚合酶。 储存条件 -20℃保存。 操作指南 1. 获得细胞培养上清 贴壁细胞：直接吸取上清。建议在细胞传代或换液3天以上，并且汇合度达到90%左右时取样 ，此时上清中支原体含量较高，便于检出。 悬浮细胞：500 g离心5分钟后，吸取上清。建议在细胞传代或换液3天以上时取样，此时支原体含量较高，便于检出。 2. 配制反应体系 将MycoBlueTM A从-20℃取出，待融化后，颠倒几次使其混匀。根据待检测样品数量(可根据需要，每次实验加上一个阴性对照、一个阳性 对照)，在微量离心管中配制如下反应体系： 单次反应体积 (μl) 总体积 (μl) TM MycoBlue A 24 × 样品数 × 1.1* TM MycoBlue B 1 *移液器存在移液误差，多出的10%是为了保证分装时每管都能分到足够的量。 用移液器轻轻吹打混匀，分装到PCR管或微量离心管中，每管25 μl。 3. 加样 第一支反应管不加入任何样品，作为阴性对照； 向其余反应管中加入1 μl待测培养上清； 向最后一管中加入1 μ