南方医大癌生物学讲义09-3 P53的生物学功能.docxVIP

第九章（3） P53的生物学功能 “我们已经知道了，P53可接受多种激活信号，DNA损伤及失调的生长信号也参与调节P53的稳定，此外，Mdm2参与泛素化调节P53降解，ARF能结合并抑制Mdm2。今天我们将主要讨论P53的分子生物学功能，及其与肿瘤发生发展的关系。” 1、DNA损伤后p53阻止细胞周期的进程并参与修复 如前所述，p53转录因子一个非常重要的靶基因就是Mdm2基因。当作为一个转录因子激活时，p53促进了Mdm2的合成，而Mdm2则能促进p53的降解。这个负反馈环保证了p53分子在合成后能很快被降解，使正常细胞中的p53蛋白维持在较低的水平。p53-Mdm2反馈环解释了p53异乎寻常的行为。在带有突变或有缺陷的p53等位基因的人类肿瘤细胞中，p53蛋白的表达水平相对于正常细胞来说几乎维持在非常高浓度。乍看起来，这似乎很奇怪，因为像p53这样的一个生长抑制的蛋白的表达水平如此高，似乎与恶性细胞的增殖相矛盾。这个悖论可以被前面提到的情况解释，即大多数突变的p53基因导致了p53蛋白丧失其转录激活能力。一个直接的后果就是p53不能诱导Mdm2的转录及蛋白质合成。在Mdm2缺失的情况下，无功能的p53可以逃脱降解，并累积到一个非常高的水平。 图9-3-1：p53突变细胞中p53的积累：用和过氧化物酶偶联的抗p53抗体染色卵巢癌组织后（细胞核被染成黑色）在显微镜下观察：卯巢癌中大量的上皮细胞由含有高水平的p53表达的细胞组成 这解释了为什么在肿瘤细胞群中容易通过免疫染色的方法检测到p53，这是在这些细胞基因组中存在突变的p53等位基因的一个明显迹象。这也解释了在被SV40感染或转化的细胞中p53蛋白含量较高的原因：p53被病毒的大T抗原隔离，抑制了p53诱导的Mdm2基因的表达，从而抑制了p53的降解。Mdm2仅仅是由p53诱导表达的基因中的一个，另外一个非常重要的靶基因就是p21Cip1。p21Cip1是一种广泛的CDK抑制剂，它可以抑制CDK2和CDKK2,?它的诱导表达解释了p53抑制细胞生长（而不是促进凋亡）的活性。这解释了p53是如何阻断细胞周期各个点而向前进展的。同时，细胞内的DNA修复机器也将被动员起来，对损伤进行修复。其中有些是直接被p53诱导的。研究证明，在带有野生型p53等基因的细胞中某些DNA修复蛋白要比在带有突变p53等位基因的细胞中能更快地动员起来。另外，DNA?修复蛋白切除改变化学碱基后，DNA聚合酶在重建DNA链的过程中发挥重要的作用，其活性在p53缺失的细胞中比野生型的对照中要低得多。当DNA被成功修复后，保护p53不被降解的信号将消失。接下来p53水平降低而p21Cip1的水平恢复正常。这使得细胞周期进程恢复，保证细胞进入S期，DNA复制得以开始。 表9-3-1：p53靶基因举例（依据功能分类） p53蛋白还可以通过其他的基因和蛋白质来增强对细胞周期的阻滞。例如，Siah-1,另一个p53诱导的基因产物，参与β-catenin的降解，而β-catenin帮助诱导?cyclin D1的合成，以通过细胞周期的G1期。β-catenin的丢失可能会引起myc基因转录的降低，除了对于G1期进程的影响，也会引起其他细胞周期各个时期的进程减慢。?p53的这些功能使得有人将其称为“基因组的保护神”。在染色体DNA受损伤之后，通过阻止细胞周期的进程和DNA的复制同时诱导DNA修复酶的表达，p53能够减少细胞基因组中突变累积的比率。此外，在DNA损伤发生时，p53将启动凋亡，进而消灭突变的细胞及它们的基因组。相反，如果失去了p53的功能，细胞将发生复制损伤且只有未被修复的DNA，这将导致它们产生相对不稳定的基因组，即在细胞增殖中积累了异常高比率突变的基因组。 2、p53引发凋亡 在大量不可修复的基因组损伤、缺氧（特别是无氧）或者许多信号失衡的情况下?，p53能够引起比可逆的细胞周期阻滞更为强烈的反应，即启动凋亡。凋亡程序依照着精细协调的计划进行。在几分钟以内，质膜形成泡状结构，细胞核断裂固缩，染色体DNA片段被裂解为小片段。通常在1h内，凋亡的细胞破碎成小的片段（凋亡小体），被邻近组织中路过的巨噬细胞快速摄入。凋亡在正常组织的生理学过程中发挥着重要作用。如：在红细胞发育的过程中，超过95%的有核红细胞（成熟红细胞前体），作为常规操作中的一部分，被从骨髓中去除。但是当血液中运输的氧气比率跌到一个限值时，或者是因为出血、各种类型的缺血或周围空气中低氧时，促红细胞生成素将快速上升，并且阻断这些红细胞前体的凋亡，使它们成熟为有功能的红细胞。在遗传学上敲除凋亡机器的主要元件的小鼠中，出现了很多特征性的发育缺陷，包括大脑中过多的神经元、面部畸形、脚趾间蹊化消失的延迟及上腮与晶状体的异常。在大脑发育的过程中，超过半数的初始