基因工程第一章基因工程概论.pptVIP

基因可以通过复制把遗传信息传递给下一代经重组的基因一般来说是能传代的，可以获得相对稳定的转基因生物。第30页，共82页，星期日，2025年，2月5日生物技术可以分为传统生物技术，工业生物发酵技术和现代生物技术。现在人们常说的生物技术实际上就是现代生物技术。现代生物技术包括基因工程、蛋白质工程、细胞工程、酶工程和发酵工程等五大工程技术。其中基因工程技术是现代生物技术的核心技术。第31页，共82页，星期日，2025年，2月5日二、基因工程（geneticengineering）也叫基因操作、遗传工程，或重组体DNA技术。一般说来所谓的基因工程是指在体外将核酸分子插入病毒、质粒或其它载体分子，构成遗传物质的新组合，并使之参入到原先没有这类分子的寄主细胞中内，而能持续稳定的繁殖。第32页，共82页，星期日，2025年，2月5日一般认为1973年是基因工程诞生的元年（S.Cohen等获得了卡那霉素和四环素双抗性的转化子菌落)理论上的三大发现和技术上的三大发明对于基因工程的诞生起到了决定性的作用。1、基因工程的诞生第33页，共82页，星期日，2025年，2月5日理论上的三大发现（1）、DNA是遗传物质被证实1944年，AveryO.T.利用肺炎双球菌转化实验（2）、DNA的双螺旋结构和半保留复制机理（3）、“中心法则”和“操纵子学说”的提出三联体密码子系统的建立第34页，共82页，星期日，2025年，2月5日（1）、工具酶的发现和应用技术上的三大发现第35页，共82页，星期日，2025年，2月5日第36页，共82页，星期日，2025年，2月5日限制性内切酶和DNA连接酶的发现（标志着DNA重组时代的开始）第37页，共82页，星期日，2025年，2月5日1970年，逆转录酶的发现。

第38页，共82页，星期日，2025年，2月5日（2）、载体的发现及其应用载体主要是小分子量的复制子如：病毒、噬菌体、质粒。1972年，美国Stanford大学的P.Berg等首次成功地实现了DNA的体外重组；第39页，共82页，星期日，2025年，2月5日SV40λ噬菌体EcoRIEcoRIT4连接酶第一个重组分子第40页，共82页，星期日，2025年，2月5日（3）、重组子导入受体细胞1944年，肺炎链球菌被成功转化。1970年，大肠杆菌才被成功转化，得益于CaCl2的应用第41页，共82页，星期日，2025年，2月5日基因工程诞生1973年，Stanford大学的Cohen等成功地利用体外重组实现了细菌间性状的转移。1973年被定为基因工程诞生的元年。第42页，共82页，星期日，2025年，2月5日Cohen等的重组实验示意图TcrNerEcoRIEcoRIT4连接酶TcrNer双抗重组菌落基因工程发展史上首次实现了重组DNA的细菌转化pSC101质粒DNAR6－5质粒DNA第43页，共82页，星期日，2025年，2月5日2.基因工程的定义：将外源基因通过体外重组后导入受体细胞内，使这个基因能在受体细胞内复制、转录、翻译表达的操作称为基因工程基因工程包括基因的分离、重组、转移以及基因在受体细胞内的保持、转录、翻译表达等全过程。第44页，共82页，星期日，2025年，2月5日基因工程的实施至少要有四个必要条件工具酶基因载体受体细胞第45页，共82页，星期日，2025年，2月5日遗传工程DNA重组基因工程区别？第46页，共82页，星期日，2025年，2月5日遗传工程是发生在遗传过程中的自然界原本存在的导致变异的一种现象，及自然出现的不同DNA链断裂并连接成新的DNA分子，新的DNA分子含有不同于亲本的DNA片段。DNA重组是人们根据遗传工程的原理利用限制性内切酶在体外对于DNA进行的人工操作，构成杂种DNA，在自然界一般不能自发实现。第47页，共82页，星期日，2025年，2月5日原核细胞表达真核细胞表达植物中表达动物中表达人体表达发酵工程转基因植物动物器官发生器转基因动物基因治疗目的基因转移转化或感染合成基因组织、器官、细胞基因组DNAcDNA文库基因文库目的基因的克隆3.基因工程的基本操作程序第三步：将目的基因导入受体细胞第四步：目的基因的检测与鉴定第一步：目的基因的获取第二步：基因表达载体构建第48页，共82页，星期日，2025年，2月5日从复杂的生物有机体基因组中，经过酶切消化或PCR