南方医大癌生物学讲义14-2上皮间叶转化（上）.docxVIP

第十四章（2）上皮间叶转化（上） 前言：发生转移的第一步是获得局部侵袭能力，需要原发瘤的癌细胞发生许多表型改变。如前所述，本节主要讨论的还是上皮组织来源的肿瘤。为了获得运动和侵袭能力，癌细胞必须丢掉许多上皮细胞的表型，改变表型、脱离上皮层、发生一系列显著的改变，这个过程称为上皮间叶转化(EMT)。今天这一小节主要先来学习两个部分的内容：“EMT的标志物”和“激发EMT的基质信号” EMT的标志物 在胚胎发育过程中，某些形态发生阶段和组织重建需要依赖各种类型的上皮细胞发生EMT。在早期胚胎发生的原肠胚形成期，外胚层的单个细胞脱落，向胚胎内部中央迁移，形成中胚层，中胚层是间叶组织包括成纤维细胞和造血细胞（在脊索动物中）的前身。在此阶段，上皮细胞层中排列的外胚层细胞，通过EMT转变为具有中胚层表型的细胞。同时，细胞通过EMT获得从一个部位（外胚层）迁移到胚胎其他（内部）部位的能力。创伤边缘的上皮细胞也必须经历暂时性的EMT,以便迁移到伤口位点并封闭损伤造成的上皮细胞层缺口。 癌细胞侵袭过程中存在的、复杂的细胞重组过程，依赖于通常在胚胎发育和成年组织损伤过程中表达程序的重激活。 正常和病理状态下的EMT,除了涉及细胞形态改变并获得运动能力外，细胞基因表达谱也发生了改变。上皮细胞标志物E-钙黏蛋白和细胞角蛋白的表达受到抑制，而诱导表达一种间叶细胞骨架中间纤维的组成成分，波形蛋白(vimentin)。发生EMT的上皮细胞通常产生纤连蛋白，这是一种在正常情况下只由间叶细胞，如成纤维细胞分泌的细胞外基质蛋白。同时，典型的成纤维细胞标志物——N-钙黏蛋白，通常取代 E-钙黏蛋白开始表达。 表1：与EMT现象相关的细胞学改变 在这所有的蛋白质中，跨膜的E-钙黏蛋白在影响上皮与间叶细胞表型方面起着非常重要的作用。在正常上皮中，E-钙黏蛋白分子的胞外结构域从胞膜表面伸出，与邻近上皮细胞同样凸出在细胞表面的E-钙黏蛋白分子形成复合物。使上皮细胞层邻近的细胞间形成同源二聚体桥，所形成的黏附连接在维持上皮细胞层的结构完整性上起非常重要的作用。 单个E-钙黏蛋白分子的胞质结构域通过α-catenin和β-catenin复合物及其他辅助蛋白锚定在细胞骨架的肌动蛋白纤维上。肌动蛋白细胞骨架为细胞提供张力。因此E-钙黏蛋白分子将邻近细胞的肌动蛋白骨架交织在一起，帮助上皮细胞层抵抗撕拉机械力。一些实验表明，单纯抑制E-钙黏蛋白的表达，就会使细胞获得间叶细胞的形态并增强运动能力。在多种人侵袭性肿瘤中，E-钙黏蛋白编码基因CDH1的启动子发生甲基化而使其表达受到抑制。 图1：伴随EMT发生的生化改变（Twist转录因子可以诱导EMT） 钙离子对维持E-钙黏蛋白的二级结构和胞外结构域的刚性是必需的，在下图中用红色小球标示。同时，E-钙黏蛋白的胞质尾部通过β-catenin和许多其他分子，连接肌动蛋白细胞骨架。β-catenin同时也在胞质中作为Wnt信号通路的一个重要中间分子。胞膜中E-钙黏蛋白的缺失释放了β-catenin分子，进而使其在胞质中累积。在Wnt信号的作用下，β-catenin从胞质转位到胞核，并与Tcf/LEF和其他转录因子结合，从而诱导EMT相关基因的表达。 图2：E-钙黏蛋白与β-catenin 在早期胚胎的原肠胚形成阶段，也可以看到EMT过程中E-钙黏蛋白表达被N-钙黏蛋白取代的现象。在培养的上皮细胞中(来自胚胎外胚层)，肝细胞生长因子(HGF)可促进E-钙黏蛋白向N-钙黏蛋白的转变。由此它可以诱导EMT,使肌细胞和皮肤前体细胞从原始的生皮肌节迁出，而后者具有早期脊椎动物胚胎体节中的上皮样细胞。 像E-钙黏蛋白一样，N-钙黏蛋白也参与细胞间的同型相互作用，它们结合在邻近细胞表面的相同类型的其他分子上。因此，表达在发生了EMT的癌细胞表面的N-钙黏蛋白分子，增强了肿瘤细胞与正常表达N-钙黏蛋白的间质细胞、特别是与上皮细胞层下方基质中的成纤维细胞的亲和性。这种结合有利于具有侵袭能力的癌细胞侵入基质细胞群。这一动态模型可以解释黑色素瘤的发展：正常的黑色素细胞表达E-钙黏蛋白，使它们与周围的角化细胞结合。黑色素瘤细胞黑色素细胞的转化衍生物表达N-钙黏蛋白，使它们浸润皮肤真皮层基质，并与成纤维细胞和内皮细胞相互作用。 图3：钙黏蛋白表达转换和黑色素瘤细胞的侵袭性 虽然从原理上讲，细胞间也可以形成N-钙黏蛋白桥，但是其表达并不会使癌细胞形成大的片层样结构。看起来，N-钙黏蛋白分子间形成的作用力要明显弱于E-钙黏蛋白的同源二聚体。这可以解释为什么细胞表面的N-钙黏蛋白分子有助于细胞的运动，相反同家族的E-钙黏蛋白则可以使细胞固定在上皮细胞层。 EMT通常由基质信号诱导 EMT由癌细胞所处的肿瘤微环境中的细胞外信号所诱导。这一观点部分来自于正常发育过程中经历的EMT