水稻品种dna指纹检测及其应用.pptxVIP

会计学;实验目的;实验原理;SSR分子标记的原理： SSR序列特征： 如：————(AG)n———— ;SSR的 PCR扩增及电泳检测一般为共显性，在F2群体中，理论上[A]：[AB]：[B] = 1：2：1 ;标记等位基因的识别与标识;表1 不同基因型SSR指纹图谱示例;应用SSR指纹图谱鉴定杂交稻真假杂种的实例;实验材料;实验方法;1) 先按9个反应所需量配制因子1-6的混合液，瞬时离心混匀 2) 将混合液分装到6个反应管中，每管17 μl 3) 向每管分别添加6个水稻品种的DNA模板， 4) 再向每管各加1小滴矿物油，瞬时离心 5) 按标记???每标记1列）将反应管安放到PCR仪上; ① 94℃ 预变性 5min ② 94℃ 变性 1min ③ 55℃ 退火 1min ④ 72℃ 延伸 1min ⑤ 重复步骤② - ④ 35次 ⑥ 72℃ 延伸 10min 注：退火温度对扩增产物的影响？;1）制胶：用1×TAE液配制4%琼脂糖凝胶70 ml+10 ul GoldViewer 2）点样：每管加入2ul溴酚兰加样缓冲液，瞬时离心。 取10ul 扩增产物点样 (请注意点样顺序) 3）电泳：稳压（100V），电泳1.5h 4）观察：紫外灯下观察电泳结果;多态性标记的筛选;;