核酸的分子杂交.pptxVIP

会计学;核酸分子杂交： 概念：具有互补序列的两条核酸单链在一定条件下，按碱基配对原则形成双链的过程。;;Content of Table;一、核酸分子杂交技术的原理; 应 用： 1）检测特定生物有机体之间是否存在亲缘关系； 2）用来揭示核酸片段中某一特定基因的存在与否、拷贝数及表达丰度。 ;二、核酸探针的制备;探针的制备方法;探针的分类： 据制备方法及核酸性质不同，可分为： 基因组DNA探针 cDNA探针 RNA探针 寡核苷酸探针;合成寡核苷酸探针注意原则：;三、核酸探针的标记;1、标记的种类;一??理想的标记物： 1）标记前后探针的基本结构、化学性质相同; 2）特异性强、本底低、重复性好； 3）操作简单、节时； 4）安全、无环境污染。;2、探针的标记方法;缺口平移法的原理;随机引物标记法原理;末端标记法原理;生物素光照标记法;四、核酸分子杂交技术; 此技术由Southern 1975年首先设计。被检测对象为DNA。 ;带有DNA片段的凝胶;（二）Northern印迹杂交;（三）Western印迹杂交;（四）斑点印迹杂交和狭线印迹杂交;(五）原位杂交in situ hybridization