DB3212_T 2035-2022鹅星状病毒病综合防控技术规范.docxVIP

ICS 11.220 CCS B 41 DB3212 泰 州 市 地 方 标 准 DB3212/T 2035—2022 鹅星状病毒病综合防控技术规范 2022-05-10发布 2022-05-10实施 泰 州 市 市 场 监 督 管 理 局 发 布 DB3212/T 2035 DB3212/T 2035—2022 前 言 本文件按照 GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第 1 部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。 本文件由江苏农牧科技职业学院提出。本文件由泰州市农业农村局归口。 本文件起草单位：江苏农牧科技职业学院、国家水禽基因库（江苏）。 本文件主要起草人：吴植、王安平、谢军、吴双、朱善元、王健、孙国波、袁敬知、纪荣超、吕海 玲。 I 鹅星状病毒病综合防控技术规范 范围 本文件规定了鹅星状病毒病诊断、预防和控制措施。 本文件适用于泰州市内的鹅场星状病毒病的诊断、预防和控制。 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB 13078 饲料卫生标准 GB 18596 畜禽养殖业污染物排放标准 NY/T 682 畜禽场场区设计技术规范 NY/T 1168 畜禽粪便无害化处理技术规范NY 5027 无公害食品 畜禽饮用水水质 NY/T 5038 无公害食品 家禽养殖生产管理规范NY/T 5339 无公害农产品 畜禽防疫准则 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 鹅星状病毒病 goose astrovirus disease 又称“鹅痛风”，是由鹅星状病毒引起的一种以雏鹅的肾脏、心包和肝脏等内脏器官及关节出现大 量尿酸盐沉积为主要特征的急性传染病。鹅星状病毒分为鹅星状病毒 1 型和鹅星状病毒 2 型。 诊断 流行病学 主要感染雏鹅，以 5 日龄~ 20 日龄的雏鹅最为易感，日龄越小，发病率和死亡率越高，最高分别 可达 80 %和 50 %。病鹅、隐性带毒鹅、带毒种蛋是主要传染源。传播途径以消化道为主。本病的发生无明显季节性，一年四季均可发生，常呈地方流行性。 临床症状 本病病程持续 3 d ~ 7 d，发病初期会出现精神不振，羽毛松乱，行动迟缓，排灰白色水样粪便， 消瘦但食欲相对正常；发病后期食欲减退至废绝，关节肿大，跛行，卧地不起，不愿走动，部分病鹅出 现单脚站立或呈现蹲姿，喙和蹼呈苍白色，最终衰竭死亡。 病理变化 本病可引起雏鹅体内多种组织器官发生病变，剖检可见心包和肝脏表面被大量白色尿酸盐沉积覆盖，肝脏淤血肿大，心包和气囊有碎渣样尿酸盐渗出物，肾脏肿大、色泽变淡、表面沉积白色斑块状尿酸盐，输尿管内可见大量白色渗出物。部分病死鹅的颈部皮下、腿部肌肉及关节腔中出现尿酸盐沉积。 病理组织学变化主要表现为肾小管上皮细胞坏死、间质出血，肾小球肿胀，脾脏有大量红细胞浸润，肝细胞空泡变性、尿酸盐沉积。 分子生物学诊断 1 DB3212/T 2035—2022 病料采集与处理 采集疑似鹅星状病毒感染死亡鹅的肝脏、脾脏和肾脏等组织样品。采集病料时，用无菌手术剪取组 织样品，置于样品保存管中，密封、编号；活禽泄殖腔/喉拭子样品，置于样品保存管中；所有样品应置于密闭容器中冷藏运输，保存温度在-15 ℃以下，时间不超过 24 h。按 RNA 提取试剂盒提取 RNA，提取的 RNA 应立即检测，否则应置于-70 ℃冻存备用。 双重实时荧光定量 PCR 检测 引物及探针的设计 鹅星状病毒 1 型引物及探针的设计 ——上游引物 F：5’- CTGGTTTCGCTGAGACTCCT - 3’； ——下游引物 R：5’- GGCCCAACTTCTGGTAGCTT - 3’； ——探针 P：5’FAM- ACGCAGTGGAGTGTTATGCCTACCAG -BHQ3’ 鹅星状病毒 2 型引物及探针的设计 ——上游引物 F：5’- GCGAGTATCTAGGCTCATTGG - 3’； ——下游引物 R：5’- ATGATGGTTGGACAGGAAAAA - 3’； ——探针 P：5’FAM- VIC-TTTTTGTAGAGACGGACTGGACGCGTTAT-BHQ3’ 反应体系与反应条件 双重荧光定量 PCR 反应体系 25 μL：2?Premix Ex Taq（Probe qPCR）12.5 μL，50?ROX Reference Dye 0.4 μL， DNA 模板 1 μL，上、下游引物（1.0 pmol/μL each）各 0.4 μL，探针（1.0 pmol/μL each） 为 0.3 μL，灭菌超纯水补足 25 μL。反应条件：95℃ 30