浙江大学生物化学实验甲植物基因组dna的提取纯化和鉴定.pptxVIP

会计学 1 浙江大学生物化学实验甲植物基因组DNA的提取纯化和鉴定 植物基因组DNA的提取纯化及鉴定 关于植物基因组的提取方法，常用的有两种：十六 烷基三乙基溴化铵（CTAB）法和十二烷基磺酸钠 （SDS）法。 传统的CTAB提取法步骤多，较繁琐，时间长，产 率低，虽然可很好地除去多糖类杂质，但酚很难完全去 除，容易影响以后的酶切等工作的效率。 SDS法则操作相对简单，条件温和，也可提取到较 高分子量的DNA ，但所得的产物含糖类杂质较多，对酶 切也有影响。本试验不进行酶切，采用SDS法提取植物基 因组DNA 。 1.2、植物基因组DNA的提取纯化原理 第1页/共10页 植物基因组DNA的提取纯化及鉴定 0 第2页/共10页 植物基因组DNA的提取纯化及鉴定 1.3、紫外吸收法测定核酸的原理 核酸分子由于含有具共轭双键结构的嘌呤和嘧啶碱 基，可强烈吸收250~280nm波长的紫外光，其最大吸收波 长为260nm，最小吸收波长为230nm。常可据此对核酸进 行定量的测定和纯度的鉴定。 1、定量测定 定量测定时可将OD260代入下列经验公式粗略计算核 酸的浓度： 第3页/共10页 植物基因组DNA的提取纯化及鉴定 0.020：每毫升溶液内含1ugDNA的OD260值。 0.024：每毫升溶液内含1ugRNA的OD260值。 L：比色杯的厚度，常为1cm。 N：稀释倍数。 2、纯度鉴定