第六章兽药残留检测技术激素类.pptVIP

柱切换技术 柱切换技术自动化程度高,在线浓缩和纯化,大大简化了样品的前处理步骤。 例如,牛组织中地塞米松测定时,样液经苯基柱初级分离后流至硅胶预富集柱中,通过柱切换,改变流动相将富集柱中的待测物洗脱至氰丙基分析柱中分离。 第三十页，共六十七页。 超临界CO2流体萃取法 超临界CO2流体萃取法具有低温、快速、无溶剂萃取的优点。 例如,超临界流体萃取法与HPLC联用,用于牛组织中地塞米松残留的测定。 第三十一页，共六十七页。 （二）同化激素的样品处理 1、样品预处理： 液体样品(尿、血浆、胆汁、牛奶)在提取前,可用水或磷酸盐缓冲液稀释。 半固体样品(肌肉、肝、肾)在提取前需要均质。 脂肪样可在40~60℃ 下加热,使脂肪融化成液体。 第三十二页，共六十七页。 2、提取 生物样品中游离的类固醇激素可以用丙酮、乙醚、乙腈、碱性乙腈、四氢呋喃、叔丁基甲醚和氯仿-甲醇等有机溶剂提取。 激素结合物的水溶性较大,不易被有机溶剂提取,可先将样品水解后再提取游离激素。 常用的水解方法有酶水解和碱水解两种。 酶水解通常使用葡糖苷酸酶/芳基硫酸酯酶,前者可专一地水解葡糖苷酸结合物,后者可水解硫酸酯结合物。 第三十三页，共六十七页。 由于尿样和组织中通常同时存在上述两种结合物,常使用葡萄糖苷酸/芳基硫酸酯混合酶,控制pH4.5~7.0,于37℃ 温育过夜。 碱水解通常使用氢氧化钠溶液,