CRISPRCas9基因敲除原理及其应用.docxVIP

. CRISPR/Cas9 基因敲除原理及其应用 CRISPR(clustered,regularlyinterspaced,shortpalindromicrepeats)是一种来自细菌降解 入侵的病毒DNA 或其他外源DNA 的免疫机制。在细菌及古细菌中，CRISPR 系统共分成 3 类，其中Ⅰ类和Ⅲ类需要多种CRISPR 相关蛋白〔Cas 蛋白〕共同发挥作用，而Ⅱ类系统只需要一种Cas 蛋白即可，这为其能够广泛应用提供了便利条件[1]。 目前，来自Streptococcuspyogenes 的CRISPR-Cas9 系统应用最为广泛。Cas9 蛋白〔含有两个核酸酶构造域，可以分别切割DN