带您全面了解检出限（进阶篇）.docVIP

带您全面了解检出限（进阶篇） 关键字：检出限作者：来源于网络????????? 目前国内鲜有检出限的细致文献报告，而分析化学的重要问题之一就是回答我们所采用方法能检出的最小浓度或量。鉴于仪器网信息网论坛越来越多关于检出限的问题，以及各种仪器在检测分析时都会经常遇到的问题，本文以及整理常规计算检出限的思路。虽然文章稍显艰涩，但对于有兴趣探究检出限深度的人士，不失为较好的开卷之物。欢迎对这个方面感兴趣的朋友一起交流切磋。检出限实际计算现有检出限的计算可以分为两大类：???????? 1、单浓度校正方法：即采用考察空白的统计特性，然后依据IUPAC的α=β=0.05错误概率推算检出限。最小信号值与仪器噪音之比（信噪比）方法其实也是同样的思路，只是此时的噪声就是空白；???????? 2、标准曲线法：此方法直接利用分析方法校准曲线的偏差特性来估算检出限。其实早在1970年意大利人Andre Hubaux and Gilbert Vos就发表了直接用一条标准曲线推算检出限的方法，该方法的核心思路可以用下面的图加以说明：Hubaux-Vos法检出限计算???????? 利用标准曲线的统计特性得到空白的分布特点（y轴），在α=0.05置信度下确定临界值，然后从信号域推算到浓度域（x轴），依然采用β=0.05置信度。此方法的推算公式非常复杂（XD为检出限）：???????? 此方法的主要优点就是适用于绝大部分间接校正的分析方法且不用单独设计实验去获得信号域推算到浓度域时用到的灵敏度。有学者甚至建议完全废除传统的单浓度校正方法，用Hubaux-Vos法代替。???????? 最后整理下检出限计算的思路（依然采用目前常用的单浓度校正方法），由于不同国家和组织中对检出限的规定不一样，整理思路对于我们理解相应的规定是非常重要的。???????? 1、寻找合适的空白进行实验，如果没有合适的空白可采用接近空白，模拟空白等；如果空白的仪器响应为0，可以人为的加入待测物质以获得空白的统计属性如标准偏差等，这时加入量必须低，因为我们认为低的加标样品跟空白的统计属性一致。EPA规定测定两组每组七个重复的低浓度加标样品，然后用F检验考察两个加标样品的标准偏差，如果没差异，就把两个标准偏差合并作为空白的标准偏差。空白测定次数要足够，由于我们考察的是空白的统计分布，必须要有足够的测定次数；不仅要考察日空白多次测定的变动性(批内差)，也要考虑不同日多次空白测定的变动性(批间差)。???????? 2、采用合适的置信度作为把握度，这明显体现在乘标准偏差的系数K值上面。考虑到低浓度水平的测量误差可能不遵从正态分布，且空白的测定次数有限，因而与K=3相应的置信水平大约为90％。此外，也有K取为4、5及6的建议。???????? 3、获取信号和浓度的关系如灵敏度，把前面得到的信号域的检出限推算成浓度域的检出限。检出限的具体计算???????? 考虑到具体实践的需要，特增加以下具体计算检出限的内容。由于目前常用IUPAC的单浓度校正方法，下面的总结主要基于它，标准曲线法计算检出限的例子以后有机会再谈。先给出基于IUPAC检出限计算的总步骤：空白特性描述-------信号域到浓度域的推算-------结合取样体积计算检出限。需要提前指出的是，不用对3倍，4倍，5倍等置信概率系数所困惑，它永远跟I， II型错误大小有关。容量分析和重量分析???????? 首先强调容量分析和重量分析属于绝对校正方法（不需要标准曲线，也不需要信号域到浓度域的推算），且两种方法的检出限肯定跟你的取样体积有关系。步骤（以容量分析例）：1．1空白特性考察???????? 两个情况：1、有读数的试剂空白。多滴几次，然后计算标准偏差，k倍标准偏差（体现了相应的置信概率，k跟测定次数和I， II型错误大小有关，一般取4.26）。2、没有读数的。直接引用滴定管的最大允差，按均匀分布转化为标准偏差，同样k倍。1．2 推算检出限???????? 把1.1的计算体积结合滴定溶液的浓度和取样的体积推算到样品的检出限。色谱分析???????? 正如我们前面讲到的，色谱分析可以有不同的检出限计算方法，下面以最为公认的2或3S/N为例：2．1 定量噪声(noise)???????? 一般的色谱噪声都可以用色谱工作站直接得到。一般来说，噪声有三种测量方式p-p，RMS，6δ方法，不同的软件可能采用不同的方式，前两种多见。三种都可以，但差异肯定有。同时我们还要区分一下可能不同的操作方法：1、在空白样品的色谱图上，在目标化合物出峰的位置选定噪声测量的时间范围，然后由软件计算噪声。2、在样品色谱图（目标化合物已出峰）的旁边选定噪声测量的时间范围。两种都可以采用。接下来就是3倍噪声。