DB15T 2540-2022羊肚菌菌种制作技术规程.docxVIP

ICS65.020.01CCS ICS 65.020.01 CCS B05 内 蒙 古 自 治 区 地 方 标 准 DB15/T 2540—2022 羊肚菌菌种制作技术规程 Regulation of strain manufacture for morehella esculenta 2022-04-25 2022-04-25 发布 2022-05-25 实施 内蒙古自治区市场监督管理局 发 布 前 言 本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。 本文件由内蒙古自治区果蔬标准化技术委员会（SAM/TC 25）归口。 本文件起草单位：内蒙古自治区农牧业科学院、赤峰市克什克腾旗农牧局、内蒙古瑞福杨种植专业合作社。 本文件主要起草人：于传宗、孙国琴、王海燕、庞杰、李亚娇、慕宗杰、于凤玲、刘瑞、田永雷、韩凤英、云伏雨、田文龙。 羊肚菌菌种制作技术规程 范围 本文件规定了羊肚菌菌种生产技术要求。 本文件适用于羊肚菌母种、原种和栽培种菌种生产技术。 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB 4806.7 食品安全国家标准 食品接触用塑料材料及制品 NY/T 528 食用菌菌种生产技术规程 NY/T 1731 食用菌菌种良好作业规范 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 下列术语和定义适用于本文件。 羊肚菌 morehella esculenta 真菌学分类属盘菌目，羊肚菌科，羊肚菌属。羊肚菌由羊肚状的可孕头状体菌盖和一个不孕的菌柄组成。表面形成许多凹坑，似羊肚状，淡黄褐色，柄白色，菌盖表面有网状棱的子实层，边缘与菌柄相连。菌柄圆筒状、中空，表面平滑或有凹槽。 菌 种 spawn 通过生产试验验证具有特异性、均一性和稳定性，丰产性好、抗性强的菌株或品种，生长在适宜基质上具结实性的菌丝培养物，包括母种、原种和栽培种。 母 种 stock culture 经各种方法选育得到的具有结实性的菌丝体纯培养物及其继代培养物。也称为一级种、试管种。 原 种 pre-culture spawn 由母种移植、扩大培养而成的菌丝体纯培养物。常以菌种瓶（玻璃菌种瓶或塑料菌种瓶）或（12～ 17）cm×（22～28）cm×（0.04～0.05）mm聚丙烯塑料袋为容器。也称为二级种。 栽培种 spawn 由原种移植、扩大培养而成的菌丝体纯培养物。常以菌种瓶（玻璃瓶或塑料瓶）或（15～17）cm× （33～35）cm×（0.04～0.05）mm聚丙烯塑料袋为容器。栽培种只能用于扩大到栽培出菇袋或直接出菇， 不可以再次扩大繁殖菌种。也称为三级种。 菌种生产要求 人员 生产所需要的技术人员和检验人员经过专业培训、掌握基础知识及菌种生产技术规程要求的相应专业技术人员。 场地、厂房要求 菌种生产应选择地势高，通风良好，空气清新，水源近，排水通畅，交通便利的场所。 冷却室、接种室，培养室都要有离子净化设施。生产设备菌种生产需要粉碎机、电子秤、搅拌机、装袋（瓶）机、高压灭菌锅或常压灭菌锅、离子净化器、超净工作台或接种箱、恒温培养箱、培养架、摇床、液体菌种灌（30 L～600 L）、显微镜等设备。符合NY/T 528规定。5 母种生产 培养基马玲薯200 g(煮汁)，葡萄糖20 g，琼脂20 g，蛋白胨0.5 g，牛肉膏0.5 g，水1000 ml。 容器 冷却室、接种室，培养室都要有离子净化设施。 生产设备 菌种生产需要粉碎机、电子秤、搅拌机、装袋（瓶）机、高压灭菌锅或常压灭菌锅、离子净化器、超净工作台或接种箱、恒温培养箱、培养架、摇床、液体菌种灌（30 L～600 L）、显微镜等设备。符合NY/T 528规定。 5 母种生产 培养基 马玲薯200 g(煮汁)，葡萄糖20 g，琼脂20 g，蛋白胨0.5 g，牛肉膏0.5 g，水1000 ml。 容器 试管选用18 mm×180 mm或者20 mm×200 mm；培养皿选用直径7 cm～9 cm 玻璃培养皿或一次性塑料培养皿。 分装和灭菌 5.3.1 斜面培养基分装和灭菌 分装培养基至试管1/4处，用棉塞或硅胶塞封闭试管口，每5支试管为1把，牛皮纸包棉塞，橡皮筋扎紧，棉塞向上放置。棉塞应采用梳棉，不能使用脱脂棉。121 ℃～122 ℃（0.11 MPa～0.12 MPa）恒温灭菌25 min。 降温至（65±5）℃ 时取出试管，在空气清洁的室内摆斜面，要求斜面长度不超过试管长度的2/3， 自然降温凝固后成斜面。从摆好的试管中抽取3 %～5 %的试管，在28