HisCCL5蛋白的纯化及鉴定.docxVIP

2 His-CCL5蛋白的纯化及鉴定 摘 要：趋化因子CCL5是一类具有细胞趋化活性的细胞因子，可调节正常T细胞的表达与分泌。 研究表明血清中 CCL5的表达水平与多种疾病进展相关，CCL5可能成为预测相关肿瘤预后的分子标志。本文旨在利用实验室前期构建 的pET-30a-CCL5原核表达载体，通过亲和层析法纯化His-CCL5重组蛋白，并通过Western Blot进行鉴定。将重组质 粒pET-30a-CCL5转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中，通过优化重组蛋白的最适表达温度和IPTG浓度，最终确 定His-CCL5在25℃、0.1mmol/L IPTG条件下以可溶蛋白的形式大量表达