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蛋白质放射性碘化标记实验 【目的】 掌握最常用的氯胺-T 法碘化蛋白的要领 学会用柱分离纯化碘化蛋白的方法 学会标记率、比放射性、放射性化学纯度的计算 【原理】 蛋白质碘化是利用蛋白质分子上的酪氨酸残基和碘正离子的置换反应， Na 125I 中的 125I 在氧化剂（氯胺-T 或 Iodogen、过氧化物酶等）作用下，被氧化成 125I2，将酪氨酸残基中酚基邻位氢置换下来，即获得碘化的蛋白质。 氯胺-T 化学名称为 N-氯代对甲苯碘酰胺钠盐，分子式为 CH3- 它在水中产生次氯酸，是一温和的氧化剂。 Na -SO2N Cl 16 16′ · 16″ · · 1 16 · · · · · · · · · · · · · · · 2 2′ 2″ 1 1 A 1′ B 1″ C 1 1 2 2 2 【试剂与器材】 1、试剂： 图 3. 放射纸层析图（单位：cm） 1% BSA（pH 7.5 0.05 MPD 配制）0.4 ml 10%三氯乙酸（TCA）10 ml 74 KBq/50 μ l Na 125I 50 μ l 50 μ g/50 μ l BSA(pH 7.5，0.5 MPB 配制)50 μ l 氯胺 T、偏重亚硫酸钠各 10 mg 临用前 1 ml pH 7.5, 0.5 MPB 溶解 10% KI 250 μ l 0.5 MPB pH7.5 50 μ l MPB pH 7