大肠杆菌群计数.docVIP

大肠杆菌群计数 前期准备：提前将试管（大、中、小各3只）、杜氏小管9只、吸量管（1ml、10ml）、培养皿干燥 试剂的调配：单料乳糖胆盐发酵管：取3.5g乳糖胆盐发酵管放入100ml的蒸馏水中，搅拌均匀 双料 乳糖胆盐发酵管：取7g乳糖胆盐发酵管放入100ml的蒸馏水中，搅拌均匀 0.85%生理盐水：取1.91g盐兑225ml生理盐水 准备：拿9只小管和9支试管 将小导管口部沿着试管壁缓慢滑下到试管底部 单料：用10ml吸量管各吸取单料液10ml放入小试管和中管中，共6个试管 双料:用20ml吸量管吸取双料液20ml放入大试管中共3个试管 生理盐水：用量筒量取9ml生理盐水放入试管中 1个 包扎：将乳糖胆盐发酵管用棉花塞塞好试管口，吸量管若干、培养皿8个+2个空白、小烧杯、生理盐水小试管用报纸包好放入灭菌锅中，拧紧锅的旋钮 灭菌：灭菌时当表数升至0.05时，关掉开关，开阀放气表数至“0”；打开开关，表数升至121，将表数控制在121（用开/关阀调节）控制15min要始终保持在121；关掉开关，开阀放气表数至“0”；打开盖，取出将吸量管、培养皿放入干燥箱内干燥1h左右 打开紫外消毒灯，将其余生理盐水、乳糖胆盐发酵管放入无菌室内冷却至室温。 将所有用品都移入无菌室内 用酒精反复消毒 关闭紫外灯 用称称取25g样品放入225ml