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(一)消毒杀灭物体表面的微生物1.煮沸2.紫外线超净台75%酒精擦手;浸泡接种器械3.化学药剂10%次氯酸钠、氯化汞浸泡离体的植物组织、器官(外植体)二、无菌技术二、无菌技术杀灭物体表面及内部的一切微生物,包括芽孢等有极强抵抗力的休眠体(二)灭菌1.高压蒸汽灭菌培养基、三角瓶等接种器材(使用前、后)对象:加水—开气阀,加热(排冷空气,使水的沸点升高)—使用:关气阀,加热—121℃,1kg/cm2压力,20min—关电源,冷却至压力表为0(内外压力相等)—打开, 超净台将灭菌后的材料烘干(除去水分以免金属器械锈蚀)—①所需温度、压力下保持20min②有葡萄糖等易碳化的物质:112℃,500g/cm2压力,30min注意事项:③灭菌材料不能放置过密 ④降至大气压再打开:防止内外压强差使器皿爆裂 不能加热的物质用什么办法?2.过滤灭菌对象:不能加热的物质,如尿素等抽滤,加快过滤灭菌灭菌后的G6玻璃砂漏斗使用:(原理:孔径小于细菌,使其不能滤过)玻璃砂漏斗使用后要1mol/L的HCL浸泡,抽滤去酸,再用蒸馏水洗至流出液中性,干燥保存注意事项:金属器械遇水易锈蚀,还可以用什么灭菌3.干热灭菌法对象:玻璃器皿、金属工具等使用:烘箱中160~170℃,1-2h4.灼烧灭菌法金属器械灭使用前还要对象:接种环、三角瓶口、试管口等①先灼烧,使表面的微生物炭化,再冷却使用:②酒精灯火焰旁操作,利用燃烧产生的上升气流减少空气中的微生物进入③打开塞子后、塞上塞子前都要灼烧
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