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核酸的酶促降解和核苷酸代谢 本章重点讨论核酸酶的类别和特点，对核苷酸的生物合成和分解代谢作一般介绍。 第一节 核酸的酶促降解第二节核苷酸的分解代谢（自学）第三节 核苷酸的合成代谢返回 核酸酶 核苷酸酶 核苷酸磷酸化酶 核酸 核苷酸 核苷 碱基+戊糖磷酸核酸的酶促降解 一、核酸酶二、限制性内切酶核糖核酸酶(RNase)脱氧核糖核酸酶(DNase)非特异性核酸酶核酸内切酶核酸外切酶核 酸 酶1、核酸酶的分类（1）根据对底物的 专一性分为（2）根据切割位点分为2、核酸酶的作用特点 p p p p p p p p外切核酸酶对核酸的水解位点BBBBBBBB5′OH3′牛脾磷酸二酯酶（ 5′端外切5得3）蛇毒磷酸二酯酶（ 3′端外切3得5）GAPyPuPyPyGACU1′OH3′5′ p p p p p p p p p p内切核酸酶对RNA的水解位点示意图RNAase T1RNAase IRNAase IRNAase T1Pu ：嘌呤Py：嘧啶 限制性内切酶 原核生物中存在着一类能识别外源DNA双螺旋中4-8个碱基对所组成的特异的具有二重旋转对称性的回文序列，并在此序列的某位点水解DNA双螺旋链，产生粘性末端或平末端，这类酶称为限制性内切酶（ristriction endonuclease）。? 类型? 命名? 意义常用的DNA限制性内切酶的专一性酶辨认的序列和切口说明Alu I‥ ‥A G C T ‥‥‥ ‥T C G A ‥ ‥四核苷酸，平端切口Bam H I六核苷酸，粘端切口‥ ‥G G A T C C ‥‥‥ ‥C C T A G G ‥‥六核苷酸，粘端切口Bgl I‥ ‥A G A T C T ‥‥‥ ‥T C T A G A ‥‥Eco R I六核苷酸，粘端切口‥ ‥G A A T T C ‥‥‥ ‥C T T A A G ‥‥Hind Ⅲ六核苷酸，粘端切口‥ ‥A A G C T T‥‥‥ ‥T T C G A A ‥‥六核苷酸，粘端切口Sal I‥ ‥G T C G A C ‥‥‥ ‥C A G C T G ‥‥Sma I六核苷酸，平端切口‥ ‥C C C G G G ‥‥‥ ‥G G G C C C ‥‥限制性内切酶类型 I型：分子量大于105，多亚基，需S-线苷蛋氨酸、ATP和Mg2+ ，识别位点与切割位点相差甚远，产物为异质，是限制与修饰相排斥的多功能酶. Ⅱ型：分子量小于105，需Mg2+ ，切割位点位于识别 位点上，产物为专一性片段，不具修饰酶功能。现在分子生物学研究所用的限制性内切酶均为此类。 ⅡI型：识别位点为5-7bp的非对称序列 ，切割位点在顺序之外离识别 序列5-10bp，切割双链，个别也切割单链。是限制与修饰相多功能酶.限制性内切酶的命名和意义例：Eco R I，这是从大肠杆菌（Ecoli）R菌珠中分离出的一种限制性内切酶Eco R I属名种名株名序号 限制性内切酶是分析染色体结构、制作DNA限制图谱、进行DNA序列测定和基因分离、基因体外重组等研究中不可缺少的工具，是一把天赐的神刀，用来解剖纤细的DNA分子。 核苷酸酶 核苷酸磷酸化酶核苷酸 核苷 碱基+（脱氧）戊糖磷酸核苷酸的降解（自学）1、嘌呤的降解2、嘧啶的降解嘌呤的分解嘧啶的分解核苷酸的合成代谢一、核糖核苷酸的生物合成二、脱氧核糖核苷酸的生物合成三、单核苷酸转变成核苷二磷酸和核苷 三磷酸（自学）四、各种核苷酸的相互转变核糖核苷酸的生物合成1、嘌呤核苷酸的生物合成(1) 从头合成途径(2) 补救途径(自学)2、嘧啶核苷酸的生物合成(1) 从头合成途径(2) 补救合成途径(自学)嘌呤核苷酸的从头合成途径 a、嘌呤环上原子的来源b、IMP的从头合成c、IMP转变为AMP和GMP来自CO2C6来自天冬氨酸来自甘氨酸N7N1C5来自甲酸C8来自甲酸C2C4N9N3来自谷氨酰胺的酰胺氮嘌呤环上各原子的来源IMP的生物合成一碳基团代谢IMP转变为GMP和AMP嘌呤核苷酸合成补救途径（自学） 磷酸核糖转移酶嘌呤+PRPPA(G)MP+PPi嘌呤核苷嘌呤+1-P-核糖ATP ADP A(G)MP嘧啶核苷酸从头合成途径 a、嘧啶环上原子的来源b、UMP的从头合成c、UMP转变为CTPCTP合成酶CTPUMPUDPUTP ATPGlnH2O4C来自天冬氨酸来自NH3C5N3来自CO2C2C61N嘧啶环上各原子的来源 尿嘧啶核苷酸合成途径嘧啶核苷酸补救合成途径（自学）尿嘧啶+PRPPUMP+PPi尿