CCK-8法(课堂PPT)课件新版.pptVIP

细胞毒性及CCK-8法 细胞毒性 细胞毒性是由细胞或者化学物质引起的单纯的细胞杀伤事件，不依赖于凋亡或坏死的细胞死亡机理。 细胞毒性检测主要是根据细胞膜通透性发生改变来进行的检测。 常用的几种方法检测细胞毒性的方法：MTT法、XTT法，CCK-8法，LDH的方法以及其它酶的方法。 MTT、XTT，CCK-8：利用线粒体内部酶的活性，可以将特定的四唑盐类进行转化，然后通过酶标仪进行检测。 LDH的方法：通过检测细胞培养上清中LDH的酶活性，来检测细胞毒性。 其它酶方法：如检测上清中碱性磷酸酶、酸性磷酸酶的活性等 细胞毒性 原理 细胞增殖能力分析试剂盒 正常细胞代谢旺盛，其线粒体内的琥珀酸脱氢酶，可将四唑盐类物质（如 MTT、XTT、WST-1等 ）还原为紫色的结晶状的物质，沉积在细胞周围然后通过酶标仪读取OD值，从而检测到细胞增值状态 荧光素发光法细胞生存能力检测 腺苷酸激酶（AK）存在于所有真核和原核细胞的胞浆中，AK具有激活ADP生成ATP。当细胞受损后，细胞膜发生破损，AK会释放到培养上清中。该试剂盒利用荧光素酶和荧光素在ATP作用下可以发光，通过化学发光仪可以定量进行检测。 LDH法细胞毒性检测 LDH（乳酸脱氢酶）是一种稳定的蛋白质，存在于正常细胞的胞质中，一旦细胞膜受损，LDH即被释放到细胞外； LDH催化乳酸形成丙酮酸盐，和INT（四唑